内容提要 | 第1-8页 |
第1章 前言 | 第8-25页 |
·CD20 与B 细胞受体(BCR)的研究背景 | 第8-15页 |
·CD20 简介 | 第8-9页 |
·BCR 简介 | 第9-14页 |
·CD20 与BCR 的联系 | 第14-15页 |
·抗B 细胞淋巴瘤抗体 | 第15-21页 |
·单克隆抗体简介 | 第15-18页 |
·抗B 淋巴瘤单抗简介 | 第18-21页 |
·实验技术与方法 | 第21-23页 |
·荧光共振能量转移(FRET) | 第21-23页 |
·重链抗体 | 第23页 |
·本论文的研究目的及设计 | 第23-25页 |
第2章 实验相关基因表达载体的的构建 | 第25-46页 |
·实验材料 | 第25-27页 |
·实验仪器 | 第25页 |
·实验试剂 | 第25-26页 |
·实验用载体与菌株 | 第26页 |
·培养基和溶液配制 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-41页 |
·构建CD20 和BCR 各部分与EGFP 的融合蛋白表达载体 | 第27-36页 |
·构建FRET 实验相关载体 | 第36-39页 |
·构建原核表达载体GST-Cμ2(266-382AA) | 第39-40页 |
·构建重链抗体样分子 | 第40-41页 |
·结果与讨论 | 第41-46页 |
·CD20 和BCR 各部分与EGFP 融合蛋白表达载体的构建 | 第41-43页 |
·FRET 实验相关质粒的构建 | 第43-44页 |
·原核表达载体GST-Cμ2(266-382AA)的构建 | 第44-45页 |
·重链抗体样分子的构建 | 第45-46页 |
第3章 CD20 分子与BCR 的相互作用 | 第46-62页 |
·实验材料 | 第46-49页 |
·实验仪器 | 第46页 |
·实验试剂及耗材 | 第46-47页 |
·实验用细胞株 | 第47页 |
·培养基和溶液配制 | 第47-49页 |
·实验方法 | 第49-53页 |
·HEK293 细胞相关实验 | 第49-51页 |
·SDS-PAGE 及Western blotting | 第51页 |
·GST 沉降实验(GST pull down assay) | 第51页 |
·FRET 实验 | 第51-52页 |
·原核细胞表达纯化GST-Cμ2(266-382AA)融合蛋白 | 第52-53页 |
·结果与讨论 | 第53-62页 |
·GST 沉降实验检测CD20 分子的相互作用蛋白 | 第53-56页 |
·FRET 实验验证 CD20(140-186AA) 与Cμ2Cμ3(266-472AA)的相互作用 | 第56-59页 |
·Cμ2(266-382AA)与CD20(140-186AA)的相互作用 | 第59-62页 |
第4章 重链抗体样分子的表达及纯化 | 第62-69页 |
·实验材料 | 第62-63页 |
·实验仪器 | 第62页 |
·实验试剂 | 第62页 |
·溶液配制 | 第62-63页 |
·实验方法 | 第63-64页 |
·ELISA 法测定重链抗体样分子表达水平 | 第63页 |
·ProteinA 柱亲和层析纯化重链抗体样分子 | 第63-64页 |
·Folin-酚法测定蛋白浓度 | 第64页 |
·结果与讨论 | 第64-69页 |
·三个重链抗体样分子的转染及稳定表达 | 第64-65页 |
·重链抗体样分子细胞表达水平的鉴定 | 第65-66页 |
·重链抗体样分子的纯化及浓度测定 | 第66-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
中文摘要 | 第77-79页 |
Abstract | 第79-81页 |