摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-21页 |
1.1 麦蚜的抗药性研究概况 | 第11-14页 |
1.1.1 麦蚜抗药性研究现状 | 第11-12页 |
1.1.2 麦蚜抗药性机制研究 | 第12-13页 |
1.1.3 吡虫啉等新烟碱类杀虫剂的抗性研究 | 第13-14页 |
1.2 转录组测序技术研究 | 第14-16页 |
1.2.1 转录组测序技术 | 第15页 |
1.2.2 转录组测序技术在昆虫研究中的应用 | 第15-16页 |
1.3 实时荧光定量PCR | 第16-18页 |
1.3.1 实时荧光定量PCR技术原理 | 第16-17页 |
1.3.2 实时荧光定量PCR技术类型 | 第17页 |
1.3.3 实时荧光定量PCR技术在昆虫研究中的应用 | 第17-18页 |
1.4 RNA干扰技术 | 第18-19页 |
1.4.1 RNAi的分子机制 | 第18-19页 |
1.4.2 RNAi在昆虫研究中的应用 | 第19页 |
1.5 研究目的及意义 | 第19-21页 |
第二章 两种杀虫剂对麦二叉蚜的触杀毒力 | 第21-24页 |
2.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.1 供试麦二叉蚜和小麦 | 第21页 |
2.1.2 试剂与药品 | 第21页 |
2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
2.2 试验方法 | 第21-22页 |
2.2.1 数据分析 | 第22页 |
2.3 结果与分析 | 第22页 |
2.4 小结 | 第22-24页 |
第三章 杀虫剂诱导麦二叉蚜细胞色素P450差异性基因表达 | 第24-34页 |
3.1 试验材料 | 第24-25页 |
3.1.1 供试麦二叉蚜 | 第24页 |
3.1.2 试剂与药品 | 第24页 |
3.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
3.2 试验方法 | 第25-27页 |
3.2.1 样品处理 | 第25页 |
3.2.2 总RNA的提取 | 第25-26页 |
3.2.3 总RNA的基因组DNA消化 | 第26页 |
3.2.4 测序数据的组装与功能分析 | 第26-27页 |
3.2.5 差异性基因表达量估计及筛选 | 第27页 |
3.3 结果与分析 | 第27-32页 |
3.4 小结 | 第32-34页 |
第四章 实时荧光定量PCR验证差异性表达的P450基因 | 第34-44页 |
4.1 实验材料 | 第34页 |
4.1.1 供试麦二叉蚜 | 第34页 |
4.1.2 主要试剂 | 第34页 |
4.1.3 仪器设备 | 第34页 |
4.2 实验方法 | 第34-38页 |
4.2.1 cDNA第一条链合成 | 第34-35页 |
4.2.2 实时荧光定量PCR | 第35-38页 |
4.2.3 数据处理与统计分析 | 第38页 |
4.3 结果与分析 | 第38-42页 |
4.3.1 扩增曲线和溶解曲线 | 第38-39页 |
4.3.2 荧光定量PCR验证差异表达基因 | 第39-42页 |
4.4 小结 | 第42-44页 |
第五章 麦二叉蚜细胞色素P450的RNA干扰研究 | 第44-52页 |
5.1 试验材料 | 第44页 |
5.1.1 供试麦二叉蚜 | 第44页 |
5.1.2 试剂与药品 | 第44页 |
5.1.3 主要仪器 | 第44页 |
5.2 试验方法 | 第44-48页 |
5.2.1 T7启动子引物设计 | 第44-45页 |
5.2.2 dsRNA的合成 | 第45-47页 |
5.2.3 麦二叉蚜人工饲料的配制与饲蚜器的制备 | 第47-48页 |
5.2.4 dsRNA的饲喂 | 第48页 |
5.2.5 荧光定量PCR检测沉默效率 | 第48页 |
5.3 结果与分析 | 第48-49页 |
5.3.1 麦二叉蚜CYP6A13mRNA的RNAi效果 | 第48-49页 |
5.3.2 饲喂dsCYP6A3-412和dsCYP6A3-370后麦二叉蚜对吡虫啉敏感度 | 第49页 |
5.4 小结 | 第49-52页 |
第六章 全文总结与讨论 | 第52-56页 |
6.1 总结 | 第52页 |
6.2 讨论 | 第52-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第63页 |