| 摘要 | 第6-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 前言 | 第18-24页 |
| 参考文献 | 第20-24页 |
| 第一部分 TGF-β1 是否参与椎间盘细胞自噬与凋亡的调节 | 第24-40页 |
| 1 研究背景 | 第24-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-29页 |
| 2.1 大鼠腰椎动静力失衡模型的制备 | 第25页 |
| 2.2 HE染色 | 第25-26页 |
| 2.3 免疫组化检测TGF-β1 的表达 | 第26页 |
| 2.4 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第26-27页 |
| 2.5 大鼠椎间盘总蛋白提取及蛋白免疫印迹技术（Western blot） | 第27-28页 |
| 2.6 统计学处理 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-35页 |
| 3.1 HE染色 | 第29页 |
| 3.2 TGF-β1 免疫组织化学 | 第29-32页 |
| 3.3 TUNEL检测细胞凋亡率 | 第32页 |
| 3.4 Western Blot | 第32-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 5 结论 | 第36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 第二部分 TGF-β1 在血清剥夺诱导的纤维环细胞自噬与凋亡相互作用中的研究 | 第40-72页 |
| 1 研究背景 | 第40-41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-50页 |
| 2.1 纤维环细胞的分离与培养 | 第41-42页 |
| 2.2 试剂与抗体 | 第42页 |
| 2.3 透射电镜 | 第42-43页 |
| 2.4 Hoechst 33258细胞凋亡检测 | 第43页 |
| 2.5 流式细胞仪检测自噬率 | 第43-44页 |
| 2.6 流式细胞仪检测凋亡率 | 第44-45页 |
| 2.7 实时荧光定量PCR | 第45-46页 |
| 2.8 纤维环细胞总蛋白提取及蛋白免疫印迹技术（Western blot） | 第46-47页 |
| 2.9 细胞免疫荧光 | 第47-48页 |
| 2.10单丹磺酰戊二胺(MDC)及LysoTracker kit检测溶酶体活性 | 第48-49页 |
| 2.11统计学分析 | 第49-50页 |
| 3 结果 | 第50-60页 |
| 3.1 血清剥夺诱导的纤维环细胞自噬和凋亡以及相互关系 | 第50-54页 |
| 3.2 血清剥夺条件下TGF-β1 在自噬和凋亡中的作用 | 第54-57页 |
| 3.3 血清剥夺条件下TGF-β1 通过抑制纤维环细胞的自噬减少其凋亡 | 第57页 |
| 3.4 TGF-β1 通过调控PI3K/AKT/mTOR及ERK1/2 通路保护血清剥夺诱导的纤维环细胞凋亡 | 第57-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 5 结论 | 第63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 第三部分 TGF-β1 抑制外源性过氧化氢诱导的纤维环细胞自噬与凋亡 | 第72-107页 |
| 1. 研究背景 | 第72-74页 |
| 2.材料与方法 | 第74-80页 |
| 2.1.纤维环细胞的分离与培养 | 第74页 |
| 2.2.试剂与抗体 | 第74页 |
| 2.3.CCK-8 监测过氧化氢刺激后的细胞活力 | 第74-75页 |
| 2.4.纤维环细胞总蛋白提取及线粒体及胞浆蛋白提取 | 第75-76页 |
| 2.5.蛋白免疫印迹技术（Western blot）简要步骤： | 第76-77页 |
| 2.6. Caspase3，8，9 酶活性的检测 | 第77页 |
| 2.7.纤维环细胞线粒体膜电位的检测 | 第77-78页 |
| 2.8.流式细胞仪检测凋亡率 | 第78-79页 |
| 2.9.GFP-LC3质粒转染及自噬水平检测 | 第79页 |
| 2.10.统计学分析 | 第79-80页 |
| 3 结果 | 第80-93页 |
| 3.1 TGF-β1 能够减轻由过氧化氢诱导的细胞毒性作用 | 第80-82页 |
| 3.2 过氧化氢促进纤维环细胞的自噬及凋亡 | 第82-86页 |
| 3.3 TGF-β1 抑制过氧化氢诱导的纤维环细胞的自噬与凋亡 | 第86-89页 |
| 3.4.TGF-β1 通过ERK通路抑制过氧化氢诱导的自噬及凋亡 | 第89-92页 |
| 3.5.TGF-β1 上调谷胱甘肽过氧化物酶，降低细胞内过氧化氢水平 | 第92-93页 |
| 4 讨论 | 第93-98页 |
| 5.结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-107页 |
| 结论 | 第107-108页 |
| 攻读学位期间撰写的学术论文目录 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
