摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
符号说明 | 第14-16页 |
绪论 | 第16-29页 |
第一部分 唑来膦酸刺激树突状细胞后诱导 γδT细胞的研究 | 第29-55页 |
1 材料与方法 | 第29-39页 |
1.1 主要试剂 | 第29-30页 |
1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
1.3 试验方法 | 第31-39页 |
1.3.1 人外周血分离获取单核细胞来源的树突状细胞 | 第31-32页 |
1.3.2 唑来膦酸刺激树突状细胞 | 第32-37页 |
1.3.3 γδT细胞培养及表型鉴定 | 第37-38页 |
1.3.4 γδ T细胞杀伤肿瘤细胞能力检测 | 第38-39页 |
2 实验结果 | 第39-47页 |
2.1 唑来膦酸刺激树突状细胞后检测 | 第39-42页 |
2.1.1 流式检测结果 | 第39页 |
2.1.2 ELISA检测结果 | 第39-40页 |
2.1.3 QT-PCR检测结果 | 第40-41页 |
2.1.4 唑来膦酸对成熟树突状细胞的影响 | 第41-42页 |
2.2 γδT细胞及相关杀伤基因检测 | 第42-45页 |
2.2.1 γδT细胞检测 | 第42-44页 |
2.2.2 γδT细胞相应杀伤活性的基因检测 | 第44-45页 |
2.3 γδT细胞杀伤肿瘤细胞能力检测 | 第45-47页 |
3 讨论 | 第47-55页 |
第二部分 高效液相色谱串联质谱法检测血浆中的异戊烯焦磷酸 | 第55-71页 |
1 材料与方法 | 第57-62页 |
1.1 主要试剂 | 第57页 |
1.2 主要仪器 | 第57页 |
1.3 试验方法 | 第57-62页 |
1.3.1 样品制备 | 第57-58页 |
1.3.2 色谱质谱条件 | 第58-59页 |
1.3.3 血浆样品前处理 | 第59页 |
1.3.4 标准曲线的制备 | 第59页 |
1.3.5 高效液相色谱质谱联用法的方法学评价 | 第59-62页 |
2 实验结果 | 第62-67页 |
2.1 异戊烯焦磷酸精密度与准确度 | 第62-63页 |
2.2 样品测定结果 | 第63-67页 |
3 讨论 | 第67-71页 |
第三部分 唑来膦酸刺激树突状细胞全基因组表达谱芯片检测 | 第71-105页 |
1 材料与方法 | 第71-81页 |
1.1 主要试剂 | 第71页 |
1.2 主要仪器 | 第71-72页 |
1.3 试验方法 | 第72-81页 |
1.3.1 树突状细胞制备 | 第72-73页 |
1.3.2 RNA抽提 | 第73-75页 |
1.3.3 样品标记 | 第75-76页 |
1.3.4 标记扩增后的cRNA并质检 | 第76-77页 |
1.3.5 芯片杂交 | 第77-79页 |
1.3.6 芯片洗涤 | 第79页 |
1.3.7 芯片扫描 | 第79-80页 |
1.3.8 数据读取 | 第80页 |
1.3.9 数据分析 | 第80-81页 |
2 实验结果 | 第81-101页 |
2.1 基因表达谱整体状况分析 | 第81-85页 |
2.1.1 Box-Plot | 第81-82页 |
2.1.2 火山图 | 第82-83页 |
2.1.3 散点图 | 第83-84页 |
2.1.4 非监督聚类 | 第84-85页 |
2.2 差异基因结果展示 | 第85-101页 |
2.2.1 上调的基因和通路 | 第85-92页 |
2.2.2 下调的基因和通路 | 第92-97页 |
2.2.3 显著富集的通路 | 第97页 |
2.2.4 T细胞的富集通路 | 第97-101页 |
3 讨论 | 第101-105页 |
结论 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
攻读学位期间发表论文及参与课题 | 第115-116页 |
综述 肺癌的免疫治疗进展 | 第116-126页 |
参考文献 | 第125-126页 |