| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略语 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 参考文献 | 第15-18页 |
| 第一部分 DKK1在大鼠骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化早期的差异性表达 | 第18-41页 |
| 前言 | 第18-19页 |
| 1 材料与方法 | 第19-26页 |
| 1.1 | 第19-20页 |
| 1.2 实验方法 | 第20-26页 |
| 1.3 统计学分析 | 第26页 |
| 2 结果 | 第26-32页 |
| 2.1 大鼠骨髓间充质干细胞形态学观察 | 第26-27页 |
| 2.2 骨髓间充质干细胞成骨、成脂诱导形态学观察 | 第27页 |
| 2.3 碱性磷酸酶染色早期成骨鉴定 | 第27-28页 |
| 2.5 油红O染色 | 第28-29页 |
| 2.6 RNA电泳完整性与PCR产物定性验证 | 第29页 |
| 2.7 Dkk1在骨髓间充质干细胞成脂分化高表达、成骨分化低表达 | 第29-32页 |
| 3 讨论 | 第32-35页 |
| 3.1 骨髓间充质干细胞的培养与成脂、成骨诱导鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2 Dkk1在骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化早期的表达 | 第33-35页 |
| 3.3 激素作用下骨髓间充质干细胞DKK1表达增加 | 第35页 |
| 4 结论 | 第35页 |
| 参考文献 | 第35-41页 |
| 第二部分 RAD-DKK1-SHRNA表达载体的构建 | 第41-58页 |
| 前言 | 第41-42页 |
| 1 材料与方法 | 第42-46页 |
| 1.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 1.3 主要仪器 | 第43-44页 |
| 1.4 实验方法 | 第44-46页 |
| 2 实验结果 | 第46-54页 |
| 2.1 pYr-1.1-DKK1-shRNA-153 XhoⅠ酶切、测序鉴定结果 | 第46-47页 |
| 2.2 pYr-1.1-DKK1-shRNA-155 XhoⅠ酶切、测序鉴定结果 | 第47-48页 |
| 2.3 pYr-1.1-DKK1-shRNA-Am SacⅠ酶切、测序鉴定结果 | 第48-50页 |
| 2.4 DKK1 CDS扩增结果 | 第50页 |
| 2.5 pYr-adshuttle-1-DKK1载体酶切、测序鉴定结果 | 第50-52页 |
| 2.6 干扰质粒转染293细胞,153干扰组、155干扰组和Am干扰组转染效果 | 第52页 |
| 2.7 RT-PCR、Western blotting检测各组细胞中rDKK1的mRNA与蛋白结果 | 第52-53页 |
| 2.8 pAd-DKK1-shRNA153重组质粒酶切、测序鉴定结果 | 第53-54页 |
| 2.9 PCR验证rAd-DKK1-shRNA重组腺病毒结果 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 第三部分 DKK1调节骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化 | 第58-73页 |
| 前言 | 第58页 |
| 1 材料与方法 | 第58-61页 |
| 1.1 | 第58-60页 |
| 1.2 实验方法 | 第60-61页 |
| 1.3 统计学分析 | 第61页 |
| 2 实验结果 | 第61-66页 |
| 2.1 rAd-EGFP转染骨髓间充质干细胞效率结果观察 | 第61-62页 |
| 2.2 腺病毒对细胞増殖影响 | 第62页 |
| 2.3 sh-DKKl抑制骨髓间充质干细胞成脂分化、促进成骨分化 | 第62-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 3.1 经典Wnt信号通道 | 第66-67页 |
| 3.2 DKK1介导的经典Wnt信号与MSCs成骨分化 | 第67页 |
| 3.3 DKK1介导的经典Wnt信号与骨髓间充质细胞成脂分化 | 第67-68页 |
| 3.4 DKK1介导wnt信号定向骨髓间充质细胞成骨与成脂分化方向 | 第68页 |
| 4 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 全文总结 | 第73-74页 |
| 综述 | 第74-87页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
