摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
目录 | 第12-15页 |
符号说明 | 第15-17页 |
技术路线图 | 第17-18页 |
1 前言 | 第18-22页 |
2 RKIP在胶质瘤中的表达及作用 | 第22-39页 |
2.1 实验材料 | 第22-24页 |
2.1.1 细胞 | 第22页 |
2.1.2 患者临床 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器设备及耗材 | 第22-23页 |
2.1.4 主要试剂 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-31页 |
2.2.1 细胞培养 | 第24页 |
2.2.2 细胞的冻存、复苏和细胞计数 | 第24-25页 |
2.2.3 过表达RKIP | 第25页 |
2.2.4 Real-time PCR检测miR-98、RKIP和HMGA2在胶质瘤组织和胶质瘤细胞中的表达 | 第25-28页 |
2.2.5 蛋白印记检测RKIP在胶质瘤细胞中的表达 | 第28-30页 |
2.2.6 BrdU标记 | 第30页 |
2.2.7 Transwell | 第30-31页 |
2.3 统计分析 | 第31页 |
2.4 结果 | 第31-36页 |
2.4.1 胶质瘤组织标本中RKIP的表达 | 第31-32页 |
2.4.2 胶质瘤细胞中RKIP的表达 | 第32页 |
2.4.3 在胶质瘤细胞U87、U251细胞中过表达RKIP效率检测 | 第32-33页 |
2.4.4 过表达RKIP对U87,U251细胞增殖能力的影响 | 第33-34页 |
2.4.5 过表达RKIP对U87,U251细胞侵袭能力的影响 | 第34-36页 |
2.5 讨论 | 第36-39页 |
3 RKIP上调miR-98抑制胶质瘤细胞的转移 | 第39-55页 |
3.1 实验材料 | 第39-41页 |
3.1.1 细胞 | 第39页 |
3.1.2 患者临床 | 第39页 |
3.1.3 主要仪器、器材 | 第39-40页 |
3.1.4 主要试剂 | 第40-41页 |
3.2 实验方法 | 第41-42页 |
3.2.1 细胞培养 | 第41页 |
3.2.2 细胞处理 | 第41-42页 |
3.2.3 QPCR | 第42页 |
3.2.4 BrdU标记 | 第42页 |
3.2.5 Transwell | 第42页 |
3.3 统计分析 | 第42-43页 |
3.4 结果 | 第43-50页 |
3.4.1 胶质瘤组织标本中miR-98的表达 | 第43页 |
3.4.2 miR-98和RKIP在正常大脑组织与胶质瘤组织中的表达相关性 | 第43-44页 |
3.4.3 胶质瘤细胞中miR-98的表达 | 第44页 |
3.4.4 miR-98转染胶质瘤细胞U87和U251细胞表达效率检测 | 第44-45页 |
3.4.5 在胶质瘤细胞U87和U251细胞中过表达RKIP对miR-98表达的影响 | 第45-46页 |
3.4.6 在胶质瘤细胞U87和U251细胞中过表达RKIP/miR-98对胶质瘤细胞增殖能力的影响 | 第46-47页 |
3.4.7 在胶质瘤细胞U87和U251细胞中过表达RKIP/miR-98对细胞侵袭能力的影响 | 第47-50页 |
3.5 讨论 | 第50-55页 |
4 RKIP上调miR-98抑制HMGA2的表达 | 第55-75页 |
4.1 实验材料 | 第55-57页 |
4.1.1 细胞 | 第55页 |
4.1.2 患者临床 | 第55页 |
4.1.3 主要仪器、器材 | 第55-56页 |
4.1.4 主要试剂 | 第56-57页 |
4.2 实验方法 | 第57-65页 |
4.2.1 细胞培养 | 第57页 |
4.2.2 细胞处理 | 第57-58页 |
4.2.3 QPCR | 第58页 |
4.2.4 Western Blot | 第58页 |
4.2.5 双荧光素酶报告基因方法 | 第58-65页 |
4.3 统计分析 | 第65页 |
4.4 结果 | 第65-70页 |
4.4.1 胶质瘤组织标本中HMGA2的表达 | 第65-66页 |
4.4.2 miR-98和HMGA2在正常大脑组织与胶质瘤组织中的表达相关性 | 第66页 |
4.4.3 胶质瘤细胞中HMGA2的表达 | 第66-67页 |
4.4.4 双荧光素酶报告基因检测miR-98靶向调控HMGA2 | 第67-69页 |
4.4.5 过表达RKIP逆转U87,U251细胞中HMGA2蛋白表达水平 | 第69页 |
4.4.6 在胶质瘤细胞U87和U251细胞中过表达RKIP/miR-98对HMGA | 第69-70页 |
4.5 讨论 | 第70-75页 |
5 结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-88页 |
综述 | 第88-102页 |
参考文献 | 第95-102页 |
攻读博士学位期间主要的研究成果 | 第102-103页 |
致谢 | 第103页 |