缩略语 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
引言 | 第10-14页 |
肿瘤细胞疫苗 | 第10-11页 |
细胞因子 | 第11页 |
免疫细胞 | 第11-12页 |
研究设想 | 第12-14页 |
实验材料 | 第14-26页 |
1.细胞系 | 第14页 |
2.培养基及主要试剂 | 第14-15页 |
3.质粒 | 第15-24页 |
4.菌株 | 第24页 |
5.主要耗材 | 第24页 |
6.主要储备液及工作液的配制 | 第24-25页 |
7.主要仪器 | 第25-26页 |
实验方法 | 第26-35页 |
1. 细胞培养 | 第26页 |
2. 质粒酶切体系 | 第26页 |
3. 琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
4. 琼脂糖凝胶回收 | 第27页 |
5. 聚合酶链式反应 | 第27页 |
6. PCR产物回收 | 第27-28页 |
7. 质粒连接 | 第28页 |
8. 质粒转化 | 第28页 |
9. 质粒小提 | 第28-29页 |
10. 质粒大提 | 第29-30页 |
11. 慢病毒病毒包装 | 第30页 |
12. 慢病毒浓缩 | 第30页 |
13. 慢病毒感染细胞 | 第30-31页 |
14. 稳定表达IL-21的细胞系的筛选 | 第31页 |
15. 细胞基因组DNA提取 | 第31-32页 |
16. IL-21的ELISA检测 | 第32页 |
17. 白介素15的ELISA检测 | 第32-33页 |
18. PBMC的分离 | 第33页 |
19. 刺激淋巴细胞增殖活化 | 第33-34页 |
20. 流式分析及分选的准备 | 第34页 |
21. 肿瘤细胞杀伤实验 | 第34页 |
22. 统计学分析 | 第34-35页 |
实验结果一 表达IL-21的白血病细胞系的建立与鉴定 | 第35-47页 |
1. lv-c-IL-21-RFP重组质粒的构建 | 第35-39页 |
2. 慢病毒的包装 | 第39-40页 |
3. 表达IL-21白血病细胞系的建立 | 第40-42页 |
4. IL-21分泌肿瘤细胞刺激淋巴细胞的增殖及表型分析 | 第42-45页 |
5. 增殖淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤 | 第45-47页 |
实验结果二 表达IL-15的白血病细胞系的建立与鉴定 | 第47-57页 |
1. lv-c-IL-15-RFP重组质粒的构建 | 第47-51页 |
2. 慢病毒的包装 | 第51页 |
3. 表达IL-15白血病细胞系的建立 | 第51-54页 |
4. IL-15分泌肿瘤细胞剌激淋巴细胞的增殖及表型分析 | 第54-55页 |
5. 增殖淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤 | 第55-57页 |
讨论 | 第57-59页 |
小结 | 第59-60页 |
综述:肿瘤免疫治疗进展 | 第60-71页 |
1 分子靶向药物 | 第61-65页 |
2 细胞因子 | 第65页 |
3 免疫细胞 | 第65-69页 |
4 肿瘤疫苗 | 第69-70页 |
5 结论与展望 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-80页 |
附录 | 第80-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
个人简历 | 第97页 |
教育经历 | 第97页 |
学术活动 | 第97-98页 |