| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 植物抗病基因研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 植物抗病基因的分类 | 第11-12页 |
| 1.1.2 植物抗病基因作用机理 | 第12页 |
| 1.1.3 基因功能的主要研究方法 | 第12-13页 |
| 1.2 中国野生葡萄抗病性研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2.1 中国的野生葡萄资源 | 第13页 |
| 1.2.2 中国野生葡萄抗病性研究 | 第13-14页 |
| 1.3 葡萄抗白粉病的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.3.1 葡萄白粉病的发病机理 | 第14页 |
| 1.3.2 葡萄属植物对白粉病的抗性 | 第14页 |
| 1.3.3 葡萄抗白粉病分子机制的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 RPW8.2 基因的研究概况 | 第15-16页 |
| 1.5 抗病基因主要的克隆方法 | 第16-17页 |
| 1.5.1 图位克隆法 | 第16-17页 |
| 1.5.2 同源克隆法 | 第17页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 VpR82H 基因的克隆及序列分析 | 第19-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第19页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第19页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第19页 |
| 2.3 方法 | 第19-21页 |
| 2.3.1 VpR82H 基因的克隆 | 第19-20页 |
| 2.3.2 白河-35-1VPR82H 基因同源序列全长的 PCR 扩增 | 第20-21页 |
| 2.3.3 PCR 扩增产物的回收 | 第21页 |
| 2.3.4 回收产物的连接 | 第21页 |
| 2.3.5 克隆转化 | 第21页 |
| 2.4 结果与分析 | 第21-25页 |
| 2.4.1 VpR82H 基因的克隆 | 第21-23页 |
| 2.4.2 VpR82H 基因的序列分析 | 第23-25页 |
| 2.5 小结 | 第25-26页 |
| 第三章 VpR82H 基因的表达特征分析 | 第26-32页 |
| 3.1 半定量 RT-PCR 分析 VpR82H 基因时空表达特征 | 第26页 |
| 3.1.1 RNA 提取及反转录 | 第26页 |
| 3.1.2 半定量 RT-PCR | 第26页 |
| 3.2 RT- PCR 试验方法分析 VpR82H 基因表达特征 | 第26-27页 |
| 3.2.1 RNA 提取及反转录 | 第27页 |
| 3.2. 2 VpR82H 基因的 R-T PCR 检测 | 第27页 |
| 3.3 结果与分析 | 第27-31页 |
| 3.3.1 VpR82H 基因组织特异性表达分析 | 第27-28页 |
| 3.3.2 VpR82H 基因在生物胁迫下的表达分析 | 第28-29页 |
| 3.3.3 VpR82H 基因在外用外源信号分子处理及低温胁迫下的表达特征分析 | 第29-31页 |
| 3.4 小结 | 第31-32页 |
| 第四章 VpR82H 基因亚细胞定位 | 第32-36页 |
| 4.1 实验材料 | 第32页 |
| 4.2 试剂与仪器 | 第32页 |
| 4.2.1 试剂 | 第32页 |
| 4.2.2 仪器 | 第32页 |
| 4.3 实验方法 | 第32-34页 |
| 4.3.1 金粉的准备 | 第32-33页 |
| 4.3.2 DNA 质粒的包埋 | 第33页 |
| 4.3.3 基因枪轰击转化 | 第33页 |
| 4.3.4 共聚焦显微镜观察 | 第33-34页 |
| 4.4 结果分析 | 第34-35页 |
| 4.4.1 VpR82H 基因亚细胞定位载体重组质粒的酶切鉴定 | 第34页 |
| 4.4.2 VpR82H 基因亚细胞定位 | 第34-35页 |
| 4.5 小结 | 第35-36页 |
| 第五章 VpR82H 基因转化拟南芥和烟草的研究 | 第36-43页 |
| 5.1 实验材料 | 第36页 |
| 5.2 试剂与仪器 | 第36页 |
| 5.2.1 菌株和载体 | 第36页 |
| 5.2.2 仪器 | 第36页 |
| 5.3 方法 | 第36-38页 |
| 5.3.1 农杆菌感受态细胞的制备及电击转化 | 第36-37页 |
| 5.3.2 拟南芥的遗传转化及转基因种子筛选 | 第37-38页 |
| 5.3.3 农杆菌介导 VpR82H 基因瞬时转化烟草 | 第38页 |
| 5.4 结果分析 | 第38-42页 |
| 5.4.1 VpR82H 基因植物表达载体构建重组质粒的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| 5.4.2 VpR82H 基因遗传转化拟南芥阳性植株鉴定 | 第39-42页 |
| 5.5 小结 | 第42-43页 |
| 第六章 讨论与结论 | 第43-46页 |
| 6.1 讨论 | 第43-44页 |
| 6.2 结论 | 第44-45页 |
| 6.3 文章创新点 | 第45页 |
| 6.4 下一步工作展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
