大肠杆菌合成迷迭香酸途径的构建
| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 迷迭香酸 | 第9-13页 |
| 1.1.1 迷迭香酸的理化性质 | 第9-10页 |
| 1.1.2 迷迭香酸的药理活性 | 第10-12页 |
| 1.1.3 迷迭香酸的市场应用 | 第12-13页 |
| 1.2 迷迭香酸制备方法 | 第13-17页 |
| 1.2.1 植物提取制备迷迭香酸 | 第13页 |
| 1.2.2 化学合成制备迷迭香酸 | 第13-14页 |
| 1.2.3 植物组织培养制备迷迭香酸 | 第14页 |
| 1.2.4 迷迭香酸的生物合成 | 第14-17页 |
| 1.3 丹参素和咖啡酸的生物合成 | 第17-18页 |
| 1.3.1 丹参素的生物合成 | 第17页 |
| 1.3.2 咖啡酸的生物合成 | 第17-18页 |
| 1.4 本文的主要研究内容和意义 | 第18-21页 |
| 1.4.1 本文的主要研究内容 | 第18-19页 |
| 1.4.2 本文的主要研究意义 | 第19-21页 |
| 第2章 大肠杆菌组成型合成丹参素 | 第21-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 实验所用菌株与质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.2 实验所用试剂与仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.3 本章所用引物 | 第23-25页 |
| 2.1.4 培养基 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-32页 |
| 2.2.1 一般PCR反应 | 第25-26页 |
| 2.2.2 重叠延伸PCR反应 | 第26-27页 |
| 2.2.3 菌落PCR | 第27页 |
| 2.2.4 质粒构建与转导 | 第27-29页 |
| 2.2.5 碱裂解法提取质粒 | 第29页 |
| 2.2.6 质粒电击转化方法 | 第29-30页 |
| 2.2.7 λ-red同源重组方法 | 第30-31页 |
| 2.2.8 发酵检测 | 第31-32页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第32-53页 |
| 2.3.1 乳酸脱氢酶的优化与表达 | 第32-35页 |
| 2.3.2 大肠杆菌组成型合成丹参素 | 第35-44页 |
| 2.3.3 抑制中间产物多巴的氧化 | 第44-46页 |
| 2.3.4 高产丹参素无抗菌株的构建 | 第46-53页 |
| 2.4 本章小结 | 第53-55页 |
| 第3章 迷迭香酸合成途径初步构建 | 第55-75页 |
| 3.1 实验材料 | 第55-58页 |
| 3.1.1 实验所用菌株与质粒 | 第55-57页 |
| 3.1.2 实验所用试剂与仪器 | 第57页 |
| 3.1.3 实验所用引物 | 第57-58页 |
| 3.2 实验方法 | 第58页 |
| 3.2.1 发酵培养基 | 第58页 |
| 3.2.2 实验所用分析方法 | 第58页 |
| 3.3 结果与分析 | 第58-74页 |
| 3.3.1 迷迭香酸合成酶的筛选与表达 | 第59-65页 |
| 3.3.2 从葡萄糖合成迷迭香酸的途径构建 | 第65-70页 |
| 3.3.3 Tal基因对于迷迭香酸合成的影响 | 第70-72页 |
| 3.3.4 MoRAS基因对于迷迭香酸合成的影响 | 第72-74页 |
| 3.4 本章小结 | 第74-75页 |
| 第4章 结论与展望 | 第75-77页 |
| 4.1 结论 | 第75页 |
| 4.2 展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
