| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 英文縮略词 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-28页 |
| 一、实验材料 | 第13-17页 |
| 1、动物实验材料 | 第13页 |
| 2、其它制剂、溶液 | 第13-14页 |
| 3、常用试剂配制 | 第14-15页 |
| 4、主要仪器设施 | 第15-16页 |
| 5、计算机软件及数据库 | 第16-17页 |
| 二、实验方法 | 第17-28页 |
| 1、琼脂糖凝胶电泳方法 | 第17-18页 |
| 2、pMD18-T载体和目的基因的连接 | 第18页 |
| 3、质粒的转化 | 第18-19页 |
| 4、质粒的小量制备 | 第19-20页 |
| 5、组织DNA抽提 | 第20页 |
| 6、组织mRNA抽提 | 第20-21页 |
| 7、高压尾静脉快冲注射 | 第21-22页 |
| 8、动物实验与血浆、血清采集 | 第22页 |
| 9、酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血浆中hFⅧ抗原 | 第22-23页 |
| 10、FⅧKO小鼠出血时间测定与APTT部分凝血酶激活时间检测 | 第23页 |
| 11、RT-PCR检测hFⅧ mRNA | 第23-24页 |
| 12、肝脏部分切除 | 第24-25页 |
| 13、Real-time PCR检测病毒在体内的表达 | 第25页 |
| 14、鼠肝PCR扩增检测病毒-AAVS1整合位点接头序列 | 第25-27页 |
| 15、ELISA检测小鼠血清中hFⅧ抗体的相对水平 | 第27页 |
| 16、统计学分析 | 第27-28页 |
| 第三章 实验结果 | 第28-37页 |
| 一、hFⅧ表达及其抗体形成 | 第28-31页 |
| 1、hFⅧ在实验小鼠体内的表达情况 | 第28-30页 |
| 2、抗hFⅧ抗体水平 | 第30-31页 |
| 二、模型动物的出、凝血指标 | 第31-33页 |
| 1、小鼠出血时间 | 第31-32页 |
| 2、APTT部分活化的凝血活酶时间 | 第32-33页 |
| 三、病毒的体内分布、表达及特异性位点整合情况 | 第33-37页 |
| 1、RT-PCR检测病毒进入肝脏后在器官内分布情况 | 第33-34页 |
| 2、nested PCR检测AAVS1接头位点序列 | 第34-36页 |
| 3、Real-time PCR检测肝切前后肝脏rAAV8-hFⅧ表达 | 第36-37页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第37-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 综述 | 第43-61页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
