| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-16页 |
| 1.1 蜱 | 第9-10页 |
| 1.2 蜱类唾液功能分子及其作用 | 第10-13页 |
| 1.2.1 宿主血液的凝血过程 | 第10-11页 |
| 1.2.2 蜱类唾液抗凝血物质 | 第11-12页 |
| 1.2.3 蜱类唾液其它抗凝物质 | 第12-13页 |
| 1.3 褐黄血蜱的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.4 Haemalin的国内外研究进展 | 第14-16页 |
| 第二章 褐黄血蜱Haemalin基因的全长 | 第16-29页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 褐黄血蜱 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16页 |
| 2.1.4 扩增引物 | 第16-17页 |
| 2.2 方法 | 第17-21页 |
| 2.2.1 褐黄血蜱RNA提取 | 第17页 |
| 2.2.2 褐黄血蜱Haemalin基因的拼接 | 第17-21页 |
| 2.2.2.1 Contig38438的3' RACE的扩增 | 第17-20页 |
| 2.2.2.2 褐黄血蜱Haemalin基因的克隆 | 第20-21页 |
| 2.2.2.3 褐黄血蜱Haemalin基因全长 | 第21页 |
| 2.2.3 褐黄血蜱Haemalin基因分析 | 第21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-28页 |
| 2.3.1 褐黄血蜱总RNA检测 | 第21-22页 |
| 2.3.2 Contig38438的3' RACE扩增 | 第22页 |
| 2.3.3 褐黄血蜱Haemalin基因全长 | 第22-23页 |
| 2.3.4 褐黄血蜱Haemalin基因分析 | 第23-25页 |
| 2.3.5 褐黄血蜱Haemalin的蛋白质结构分析 | 第25-26页 |
| 2.3.6 褐黄血蜱Haemalin同源性比较 | 第26-27页 |
| 2.3.7 Haemalin系统进化树构建与分析 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 褐黄血蜱Haemalin的表达与鉴定 | 第29-41页 |
| 3.1 材料 | 第29-30页 |
| 3.1.1 褐黄血蜱 | 第29页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第29页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.4 引物设计 | 第30页 |
| 3.2 方法 | 第30-34页 |
| 3.2.1 合成CDNA | 第30页 |
| 3.2.2 Haemalin片段的克隆 | 第30-31页 |
| 3.2.3 PGEX-4T-Haemalin重组质粒的构建 | 第31-32页 |
| 3.2.4 Haemalin的原核表达 | 第32页 |
| 3.2.5 重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第32-33页 |
| 3.2.6 重组蛋白的Western Blot鉴定 | 第33页 |
| 3.2.7 Haemalin融合蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 3.2.8 Haemalin融合蛋白浓度的测定 | 第34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-39页 |
| 3.3.1 Haemelin片段PCR扩增 | 第34-35页 |
| 3.3.2 PGEX-4T-Haemalin重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3.3 重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第36-37页 |
| 3.3.4 融合蛋白Western Blot鉴定 | 第37页 |
| 3.3.5 Haemelin融合蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| 3.3.6 Haemalin融合蛋白浓度的测定 | 第38-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 褐黄血蜱Haemalin抗凝机制的研究 | 第41-48页 |
| 4.1 材料 | 第41-42页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第41页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第41-42页 |
| 4.2 方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 洗脱液的处理 | 第42页 |
| 4.2.2 大鼠血浆的制备 | 第42-43页 |
| 4.2.3 Haemalin融合蛋白抗凝功能的测定 | 第43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-46页 |
| 4.3.1 对凝血酶原时间（PT）测定 | 第43-44页 |
| 4.3.2 对凝血酶时间（TT）测定 | 第44-45页 |
| 4.3.3 对活化部分凝血酶时间（APTT）测定 | 第45页 |
| 4.3.4 对纤维蛋白原（FIB）测定 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61-62页 |
| 附录1 论文中的重要英文缩写 | 第62-63页 |
| 附录2 褐黄血蜱Haemalin全长基因 | 第63-65页 |
| 附表3 PGEX-4T-1载体 | 第65页 |
