| 中文摘要 | 第3-7页 |
| abstract | 第7-12页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一部分 脂肪干细胞的分离、纯化、培养及鉴定 | 第19-30页 |
| 前言 | 第19页 |
| 1 实验材料 | 第19-21页 |
| 1.1 实验动物 | 第19页 |
| 1.2 主要仪器及设备 | 第19-20页 |
| 1.3 主要试剂 | 第20-21页 |
| 1.4 主要试剂的配置 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.1 SD大鼠脂肪干细胞的分离 | 第21-22页 |
| 2.2 SD大鼠脂肪干细胞的培养、纯化及传代 | 第22页 |
| 2.3 SD大鼠脂肪干细胞表面抗原CD44免疫荧光检测 | 第22页 |
| 2.4 SD大鼠脂肪干细胞成骨诱导分化及茜素红染色 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-24页 |
| 3.1 SD大鼠脂肪干细胞的形态学性状观察 | 第23页 |
| 3.2 SD 大鼠脂肪干细胞表面抗原 CD44 的免疫荧光鉴定 | 第23-24页 |
| 3.3 SD大鼠脂肪干细胞成骨分化潜能鉴定 | 第24页 |
| 4 讨论 | 第24-30页 |
| 第二部分 Wnt通路和BMP-2互反馈调节在脂肪干细胞成骨分化中的机制 | 第30-66页 |
| 前言 | 第30页 |
| 1 实验材料 | 第30-36页 |
| 1.1 实验动物 | 第30-31页 |
| 1.2 主要仪器及设备 | 第31-32页 |
| 1.3 主要试剂 | 第32-33页 |
| 1.4 慢病毒 | 第33页 |
| 1.5 主要试剂的配置 | 第33-35页 |
| 1.6 引物设计与合成 | 第35-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-42页 |
| 2.1 SD大鼠脂肪干细胞的分离、培养、纯化及传代 | 第36页 |
| 2.2 SD大鼠脂肪干细胞成骨诱导分化及茜素红染色 | 第36页 |
| 2.3 实验分组 | 第36页 |
| 2.4 细胞增殖分析实验 | 第36-37页 |
| 2.4.1 CCK-8试剂盒标准曲线制作 | 第36-37页 |
| 2.4.2 细胞增殖检测 | 第37页 |
| 2.5 慢病毒转染 | 第37页 |
| 2.6 RealTimePCR检测目的基因引物 | 第37-40页 |
| 2.6.1 提取样本总RNA | 第37页 |
| 2.6.2 逆转录 | 第37-38页 |
| 2.6.3 实时定量PCR扩增及分析 | 第38-40页 |
| 2.7 提取细胞总蛋白 | 第40页 |
| 2.8 BCA法检测蛋白浓度 | 第40-41页 |
| 2.9 蛋白免疫印迹 | 第41-42页 |
| 2.10 细胞免疫荧光 | 第42页 |
| 2.11 统计学分析 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-51页 |
| 3.1 Wnt通路被激活后对脂肪干细胞增殖的影响 | 第42-43页 |
| 3.2 脂肪干细胞成骨诱导分化各时期,成骨相关指标及Wnt通路相关因子的表达情况 | 第43-44页 |
| 3.3 脂肪干细胞成骨诱导分化早期Wnt通路的作用 | 第44-45页 |
| 3.4 脂肪干细胞成骨诱导分化中期、晚期Wnt通路的作用 | 第45-46页 |
| 3.5 脂肪干细胞成骨诱导分化后期成骨相关指标及Wnt通路相关因子的表达情况 | 第46-47页 |
| 3.6 脂肪干细胞成骨诱导分化后期Wnt通路的作用 | 第47-48页 |
| 3.7 脂肪干细胞慢病毒转染及BMP-2蛋白表达鉴定 | 第48-49页 |
| 3.8 BMP-2慢病毒转染后,脂肪干细胞成骨诱导分化过程中成骨指标及Wnt相关因子的表达情况 | 第49-50页 |
| 3.9 BMP-2过表达对成骨分化过程中Wnt信号通路的影响情况. | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-65页 |
| 4.1 骨性关节炎的流行病学 | 第51-52页 |
| 4.2 中国传统医学对骨性关节炎的认识 | 第52-55页 |
| 4.2.1 骨性关节炎的病因病机及其辩证分型 | 第52-53页 |
| 4.2.2 中国传统医学对骨性关节炎的治疗 | 第53-55页 |
| 4.3 现代医学学对骨性关节炎的认识及治疗 | 第55-60页 |
| 4.3.1 骨性关节炎的病因 | 第55-57页 |
| 4.3.2 骨性关节炎典型的临床表现 | 第57页 |
| 4.3.3 骨性关节炎的主要病理改变 | 第57页 |
| 4.3.4 骨性关节炎的治疗 | 第57-60页 |
| 4.4 骨性关节炎与骨质疏松的关系 | 第60-61页 |
| 4.5 经典Wnt通路与骨关节炎的关系 | 第61-62页 |
| 4.6 BMP-2与骨关节炎的关系 | 第62-63页 |
| 4.7 RUNX2与骨关节炎的关系 | 第63页 |
| 4.8 Wnt通路和BMP-2互反馈调节在脂肪干细胞成骨分化中的机制 | 第63-65页 |
| 5 不足与展望 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 英文缩略词表 | 第75-76页 |
| 综述 | 第76-87页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 | 第88页 |
