| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 插图和附表清单 | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-14页 |
| 1.1 柠条锦鸡儿的简介 | 第10-11页 |
| 1.1.1 我国柠条锦鸡儿的分布及利用 | 第10页 |
| 1.1.2 柠条锦鸡儿的特性 | 第10-11页 |
| 1.1.3 柠条锦鸡儿的研究现状 | 第11页 |
| 1.2 CAAD超家族简介 | 第11-14页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第14页 |
| 2.1.2 菌种 | 第14页 |
| 2.1.3 试剂及耗材 | 第14-15页 |
| 2.1.4 试验仪器及设备 | 第15页 |
| 2.2 试验方法 | 第15-25页 |
| 2.2.1 植物的培养及处理 | 第15-17页 |
| 2.2.1.1 柠条锦鸡儿的培养及样品处理 | 第15-16页 |
| 2.2.1.2 土壤中生长拟南芥的培养及样品处理 | 第16页 |
| 2.2.1.3 培养器中生长拟南芥的培养及样品处理 | 第16-17页 |
| 2.2.2 主要试剂的配制 | 第17页 |
| 2.2.3 拟南芥和柠条锦鸡儿基因组DNA的提取 | 第17页 |
| 2.2.4 柠条锦鸡儿基因组cDNA的获得 | 第17-18页 |
| 2.2.5 拟南芥基因组cDNA的获得 | 第18页 |
| 2.2.6 目的基因cDNA末端快速扩增(RACE) | 第18页 |
| 2.2.7 目的基因的克隆和测序 | 第18-19页 |
| 2.2.8 感受态的制备和目的片段的连接转化 | 第19页 |
| 2.2.9 质粒的提取和目的片段胶回收 | 第19页 |
| 2.2.10 CkCAAD1基因启动子的克隆和测序 | 第19页 |
| 2.2.11 引物合成和测序 | 第19-21页 |
| 2.2.12 实时荧光定量PCR检测 | 第21页 |
| 2.2.12.1 实时荧光定量PCR的引物设计 | 第21页 |
| 2.2.12.2 实时荧光定量PCR的反应 | 第21页 |
| 2.2.13 植物表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.14 拟南芥的遗传转化 | 第22-23页 |
| 2.2.14.1 农杆菌的转化 | 第22-23页 |
| 2.2.14.2 农杆菌的培养 | 第23页 |
| 2.2.14.3 拟南芥的转化 | 第23页 |
| 2.2.15 转基因植物的筛选 | 第23-24页 |
| 2.2.16 拟南芥叶肉原生质体的制备及瞬时表达 | 第24-25页 |
| 2.2.16.1 所需药品的配制 | 第24页 |
| 2.2.16.2 拟南芥叶肉原生质体的制备及转化 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-37页 |
| 3.1 CkCAAD1基因全长序列的获得 | 第25-27页 |
| 3.1.1 利用RACE技术获得CkCAAD1基因的cDNA序列 | 第25-26页 |
| 3.1.2 CkCAAD1基因gDNA序列的克隆 | 第26-27页 |
| 3.2 CkCAAD1基因的生物信息学分析 | 第27-32页 |
| 3.2.1 CkCAAD1基因内含子与外显子的分析 | 第27-28页 |
| 3.2.2 CkCAAD1氨基酸序列分析结果 | 第28-29页 |
| 3.2.3 CkCAAD1蛋白质的亲/疏水性分析结果 | 第29页 |
| 3.2.4 CkCAAD1蛋白质的二级结构分析结果 | 第29-30页 |
| 3.2.5 CkCAAD1蛋白质结构域的预测 | 第30-31页 |
| 3.2.6 CkCAAD1蛋白系统进化分析 | 第31-32页 |
| 3.3 CkCAAD1基因启动子序列的获得及分析 | 第32-34页 |
| 3.3.1 CkCAAD1基因启动子序列的获得 | 第32页 |
| 3.3.2 CkCAAD1基因启动子序列的分析 | 第32-34页 |
| 3.4 CkCAAD1基因表达分析 | 第34-35页 |
| 3.5 CkCAAD1蛋白的亚细胞定位 | 第35-36页 |
| 3.5.1 GFP融合载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.5.2 亚细胞定位 | 第36页 |
| 3.6 CkCAAD1基因过表达载体的构建及转基因植物的筛选 | 第36-37页 |
| 3.6.1 CkCAAD1基因过表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.6.2 CkCAAD1转基因植物的筛选 | 第37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 作者简介 | 第45页 |
