| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1 赭曲霉毒素A的简介 | 第12-14页 |
| 1.1.1 赭曲霉毒素A的毒性机制 | 第13页 |
| 1.1.2 中国赭曲霉毒素A污染现状 | 第13-14页 |
| 1.2 OTA的检测方法 | 第14-17页 |
| 1.2.1 色谱法和免疫法测定OTA | 第14-16页 |
| 1.2.2 实际样品的预处理或浓缩过程 | 第16-17页 |
| 1.3 人工制备完全抗原的理论基础 | 第17-18页 |
| 1.3.1 载体的选择 | 第17页 |
| 1.3.2 偶联方法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 人工合成抗原的分离纯化 | 第18页 |
| 1.4 抗体的制备 | 第18-19页 |
| 1.4.1 动物免疫 | 第18-19页 |
| 1.4.2 单克隆抗体制备 | 第19页 |
| 1.5 酶联免疫吸附实验简介 | 第19-21页 |
| 1.5.1 直接和间接ELISA | 第20页 |
| 1.5.2 夹心ELISA | 第20-21页 |
| 1.5.3 竞争ELISA | 第21页 |
| 1.6 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 OTA人工抗原的合成与鉴定 | 第23-35页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要试剂及耗材 | 第24页 |
| 2.1.3 实验主要溶液 | 第24-26页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 完全抗原的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.2 OTA完全抗原的鉴定 | 第27-29页 |
| 2.3 结果 | 第29-33页 |
| 2.3.1 抗原浓度测定 | 第29页 |
| 2.3.2 紫外扫描和偶联比 | 第29-31页 |
| 2.3.4 SDS-PAGE鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.5 免疫学检测 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 2.4.1 载体选择 | 第33页 |
| 2.4.2 偶联方法的选择 | 第33-34页 |
| 2.4.3 人工完全抗原鉴定方法的选择 | 第34页 |
| 2.5 小结 | 第34-35页 |
| 3 OTA单克隆抗体的制备及鉴定 | 第35-48页 |
| 3.1 材料 | 第35-37页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.2 主要试剂及耗材 | 第36页 |
| 3.1.3 实验溶液 | 第36页 |
| 3.1.4 实验动物及细胞 | 第36-37页 |
| 3.2 方法 | 第37-42页 |
| 3.2.1 骨髓瘤细胞培养 | 第37页 |
| 3.2.2 融合鼠的选择及超免 | 第37页 |
| 3.2.3 饲养细胞的制备 | 第37页 |
| 3.2.4 细胞融合 | 第37-39页 |
| 3.2.5 阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第39页 |
| 3.2.6 阳性杂交瘤细胞的亚克隆 | 第39页 |
| 3.2.7 阳性克隆细胞的扩大培养及冻存 | 第39-40页 |
| 3.2.8 单抗腹水的制备 | 第40页 |
| 3.2.9 单抗腹水的纯化 | 第40页 |
| 3.2.10 单抗浓度与纯度的检测 | 第40-41页 |
| 3.2.11 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第41页 |
| 3.2.12 单抗效价与抑制的测定 | 第41页 |
| 3.2.13 单克隆抗体亲和力的测定 | 第41-42页 |
| 3.3 结果 | 第42-46页 |
| 3.3.1 杂交瘤细胞株的建立 | 第42-43页 |
| 3.3.2 单抗浓度及纯度 | 第43页 |
| 3.3.3 单抗亚型鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.4 单抗效价及敏感性检测 | 第44-45页 |
| 3.3.5 单抗亲和力测定 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.4.1 关于细胞融合 | 第46页 |
| 3.4.2 关于杂交瘤细胞的筛选 | 第46页 |
| 3.4.3 关于单克隆抗体的大量制备与纯化 | 第46-47页 |
| 3.5 小结 | 第47-48页 |
| 4 OTA直接竞争ELISA试剂盒的研制 | 第48-62页 |
| 4.1 材料 | 第48-50页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第48-49页 |
| 4.1.2 主要试剂及耗材 | 第49页 |
| 4.1.3 实验溶液 | 第49-50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-54页 |
| 4.2.1 酶标抗体的制备 | 第50-51页 |
| 4.2.2 OTA直接竞争ELISA试验条件的优化及方法的建立 | 第51-52页 |
| 4.2.3 OTA-Kit的配置、操作步骤及结果判定 | 第52-53页 |
| 4.2.4 样品的处理 | 第53页 |
| 4.2.5 OTA-Kit性能测定 | 第53-54页 |
| 4.3 结果 | 第54-60页 |
| 4.3.1 OTAcd-ELISA的建立和反应条件的优化 | 第54-57页 |
| 4.3.2 OTA-Kit性能测定 | 第57-60页 |
| 4.4 讨论 | 第60-61页 |
| 4.4.1 关于ELISA实验条件的优化 | 第60页 |
| 4.4.2 关于OTA-Kit的质量特性 | 第60-61页 |
| 4.5 小结 | 第61-62页 |
| 5 实验结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 附录 英文缩写词汇表 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第73页 |
