| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 常用缩写词中英文对照表 | 第12-13页 |
| 缩写名词附表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 1 仪器与材料 | 第16-19页 |
| 1.1 主要仪器 | 第16页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第16-17页 |
| 1.3 主要配置试剂 | 第17-19页 |
| 2 方法 | 第19-36页 |
| 2.1 方法设计思路 | 第19-20页 |
| 2.2 获取细胞核蛋白 | 第20-22页 |
| 2.2.1 THP-1、Hela细胞的复苏 | 第20页 |
| 2.2.2 THP-1、Hela细胞换液和传代 | 第20-21页 |
| 2.2.3 THP-1、Hela细胞的冻存 | 第21页 |
| 2.2.4 THP-1、Hela细胞的核蛋白提取 | 第21页 |
| 2.2.5 BCA法测核蛋白浓度 | 第21-22页 |
| 2.3 凝胶电泳迁移实验 | 第22-25页 |
| 2.3.1 结合探针设计 | 第22页 |
| 2.3.2 EMSA | 第22-24页 |
| 2.3.3 化学发光法检测 | 第24页 |
| 2.3.4 竞争结合反应 | 第24页 |
| 2.3.5 super-shift反应 | 第24-25页 |
| 2.4 质粒分析载体的构建 | 第25-30页 |
| 2.4.1 扩增C1orf109启动子区 | 第25-28页 |
| 2.4.2 构建基础质粒A | 第28-29页 |
| 2.4.3 构建203和265的报告载体 | 第29-30页 |
| 2.4.4 报告载体的命名 | 第30页 |
| 2.5 报告质粒109等瞬时转染Hela细胞 | 第30-32页 |
| 2.5.1 过表达载体MAZ或SP1条件下转染Hela细胞 | 第30-31页 |
| 2.5.2 特异性抑制MAPK途径磷酸化条件下转染Hela细胞 | 第31页 |
| 2.5.3 选择性CK2激酶抑制条件下转染Hela细胞 | 第31-32页 |
| 2.6 统计学处理 | 第32页 |
| 2.7 检测C1orf109是否表达转录产物 | 第32-33页 |
| 2.7.1 265报告载体转染Hela细胞 | 第32页 |
| 2.7.2 检测 Hela中265的内源性表达 | 第32-33页 |
| 2.8 构建203、265表达质粒 | 第33-34页 |
| 2.9 测序验证 | 第34页 |
| 2.10 实时定量PCR | 第34-36页 |
| 3 结果 | 第36-51页 |
| 3.1 EMSA结果 | 第36-38页 |
| 3.2 报告载体构建结果 | 第38-40页 |
| 3.2.1 质粒A构建结果 | 第38-39页 |
| 3.2.2 PCR扩增C1orf109启动子区结果 | 第39页 |
| 3.2.3 203 、265报道载体构建结果 | 第39-40页 |
| 3.3 报告载体109等转染结果 | 第40-47页 |
| 3.3.1 激光共聚焦结果 | 第40-44页 |
| 3.3.2 流式细胞仪数据分析结果 | 第44-45页 |
| 3.3.3 特异性MAPK途径磷酸化抑制条件下的转染结果 | 第45页 |
| 3.3.4 选择性CK_2激酶抑制剂条件下的转染结果 | 第45-47页 |
| 3.4 产物265预测表达的实验结果 | 第47-51页 |
| 3.4.1 265报道载体109L的转染结果 | 第47-48页 |
| 3.4.2 Hela细胞内源性265表达检测结果 | 第48-49页 |
| 3.4.3 表达载体构建结果 | 第49页 |
| 3.4.4 测序结果 | 第49-50页 |
| 3.4.5 RT-PCR初步结果 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 4.1 转录因子MAZ与C1orf109启动子区结合 | 第51页 |
| 4.2 转录因子MAZ和SP1结合位点的关系 | 第51页 |
| 4.3 MAZ与SP1对C1orf109的调控复杂且重要 | 第51-53页 |
| 4.4 选择性CK2激酶抑制剂影响C1orf109基因的转录表达 | 第53页 |
| 4.5 C1orf109可能表达含265个氨基酸的蛋白变异体 | 第53-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 综述 | 第58-65页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果 | 第66-67页 |
| 个人简历 | 第67页 |
