| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-15页 |
| 1.1 哺乳动物繁殖与季节性繁殖 | 第9页 |
| 1.2 RFRP-3 对哺乳动物繁殖的调控研究进展 | 第9-12页 |
| 1.2.1 GnRH 研究概况 | 第9-10页 |
| 1.2.2 RFRP-3 研究概况 | 第10-11页 |
| 1.2.3 RFRP-3 与哺乳动物繁殖 | 第11-12页 |
| 1.3 RFRP-3 介导光周期对哺乳动物季节性繁殖的影响进展 | 第12-13页 |
| 1.3.1 光周期与哺乳动物季节性繁殖 | 第12页 |
| 1.3.2 哺乳动物 RFRP-3 对 MT 及光周期信号的响应 | 第12-13页 |
| 1.3.3 RFRP-3 调控哺乳动物 GnRH 的季节性释放 | 第13页 |
| 1.4 黑线仓鼠研究进展 | 第13-14页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第15-24页 |
| 2.1 动物 | 第15-16页 |
| 2.2 实验仪器 | 第16-17页 |
| 2.3 实验试剂 | 第17页 |
| 2.4 黑线仓鼠 RFRP 基因克隆 | 第17-21页 |
| 2.4.1 下丘脑总 RNA 的提取及反转录 | 第17-18页 |
| 2.4.2 引物设计 | 第18-19页 |
| 2.4.3 目的片段扩增 | 第19页 |
| 2.4.4 目的产物的琼脂糖凝胶电泳及回收 | 第19-20页 |
| 2.4.5 连接 | 第20页 |
| 2.4.6 制备 DH5α感受态细胞 | 第20页 |
| 2.4.7 转化并筛选阳性克隆 | 第20-21页 |
| 2.4.8 鉴定阳性克隆 | 第21页 |
| 2.4.9 保种送测 | 第21页 |
| 2.4.10 信息学分析 | 第21页 |
| 2.5 黑线仓鼠 RFRP mRNA 实时荧光定量表达 | 第21-24页 |
| 2.5.1 荧光定量引物设计 | 第22页 |
| 2.5.2 黑线仓鼠 RFRP-3 标准曲线和融解曲线绘制 | 第22页 |
| 2.5.3 黑线仓鼠发情周期鉴定 | 第22-23页 |
| 2.5.4 黑线仓鼠 RFRP 及 GnRH （引物）时空差异表达 | 第23页 |
| 2.5.5 黑线仓鼠下丘脑中 RFRP-3 表达定位 | 第23-24页 |
| 2.5.6 四季黑线仓鼠血清中 MT、RFRP-3 浓度测定 | 第24页 |
| 2.5.7 统计学分析 | 第24页 |
| 第三章 实验结果 | 第24-38页 |
| 3.1 黑线仓鼠 RFRP 基因克隆 | 第24-28页 |
| 3.1.1 下丘脑 RNA 提取结果 | 第24-25页 |
| 3.1.2 黑线仓鼠 RFRP 基因 RT-PCR 结果 | 第25页 |
| 3.1.3 RFRP 基因序列信息学分析 | 第25-26页 |
| 3.1.4 黑线仓鼠 RFRP 序列相似性比较分析 | 第26-27页 |
| 3.1.5 黑线仓鼠 RFRP 系统进化分析 | 第27-28页 |
| 3.2 黑线仓鼠各组织 RFRP mRNA 的相对表达结果 | 第28-32页 |
| 3.2.1 黑线仓鼠 RFRP 基因 RT-PCR 结果 | 第28-29页 |
| 3.2.2 RFRP 与 Beta-actin 标准曲线、融解曲线、扩增曲线结果 | 第29-30页 |
| 3.2.3 黑线仓鼠中 RFRP mRNA 表达结果 | 第30-31页 |
| 3.2.4 黑线仓鼠下丘脑中 RFRP-3 表达定位结果 | 第31-32页 |
| 3.3 黑线仓鼠不同发育和不同发情时期 RFRP 及 GnRH 的相对表达 | 第32-36页 |
| 3.3.1 荧光定量 PCR 扩增 GnRH 引物验证结果 | 第32页 |
| 3.3.2 黑线仓鼠不同发育时期 RFRP 及 GnRH 的相对定量 | 第32-34页 |
| 3.3.3 黑线仓鼠发情周期鉴定结果 | 第34页 |
| 3.3.4 黑线仓鼠不同发情时期 RFRP 及 GnRH 的相对定量 | 第34-36页 |
| 3.4 黑线仓鼠不同季节 RFRP 及 GnRH 的相对表达 | 第36-38页 |
| 3.4.1 黑线仓鼠四季血清中 MT、RFRP-3 浓度测定结果 | 第36-37页 |
| 3.4.2 黑线仓鼠不同季节 RFRP、GnRH 的相对定量结果 | 第37-38页 |
| 第四章 讨论 | 第38-43页 |
| 4.1 RFRP 基因序列的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 4.2 RFRP 基因的组织分布 | 第39-40页 |
| 4.3 RFRP-3 与黑线仓鼠繁殖的关系 | 第40-41页 |
| 4.4 RFRP-3 对黑线仓鼠季节性繁殖的调控 | 第41-43页 |
| 第五章 结论 | 第43-44页 |
| 第六章 创新及展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 在校期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
