| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩写词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-22页 |
| 第1章 嗜水气单胞菌的研究进展 | 第12-16页 |
| 第2章 嗜水气单胞菌鞭毛研究进展 | 第16-19页 |
| 第3章 细菌性鱼病研究进展 | 第19-22页 |
| 第二篇 研究内容 | 第22-48页 |
| 第1章 嗜水气单胞菌鞭毛蛋白的纯化，IgM 多抗的制备及 HRP 标记 | 第22-30页 |
| 1 材料与方法 | 第22-26页 |
| 1.1 材料 | 第22-23页 |
| 1.1.1 菌株 | 第22页 |
| 1.1.2 培养基 | 第22页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第22页 |
| 1.1.4 仪器 | 第22-23页 |
| 1.2 方法 | 第23-26页 |
| 1.2.1 嗜水气单胞菌鞭毛蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| 1.2.2 嗜水气单胞菌鞭毛蛋白多抗制备及纯化 | 第24页 |
| 1.2.3 IgM 多克隆抗体的制备及 HRP 标记 | 第24-26页 |
| 2 结果 | 第26-28页 |
| 2.1 鞭毛蛋白 SDS-PAGE 分析 | 第26页 |
| 2.2 嗜水气单胞菌鞭毛透射电镜 | 第26-27页 |
| 2.3 IgM 的 Wetern-blot 分析 | 第27页 |
| 2.4 ELISA 方法检测 HRP 标记抗体效价 | 第27-28页 |
| 3 讨论 | 第28-29页 |
| 3.1 透射电镜负染技术 | 第28页 |
| 3.2 嗜水气单胞菌鞭毛蛋白的纯化 | 第28页 |
| 3.3 兔抗鲫鱼免疫球蛋白抗体的 HRP 标记 | 第28-29页 |
| 4 小结 | 第29-30页 |
| 第2章 嗜水气单胞菌鞭毛蛋白基因 flaB 的克隆及表达 | 第30-41页 |
| 1 材料与方法 | 第30-34页 |
| 1.1 材料 | 第30页 |
| 1.1.1 质粒 | 第30页 |
| 1.1.2 酶与试剂 | 第30页 |
| 1.1.3 仪器 | 第30页 |
| 1.2 方法 | 第30-34页 |
| 1.2.1 细菌基因组 DNA 的提取 | 第30页 |
| 1.2.2 大肠杆菌感受态的制备 | 第30-31页 |
| 1.2.3 目的基因的克隆 | 第31-32页 |
| 1.2.4 构建原核表达载体 | 第32-33页 |
| 1.2.5 诱导表达 | 第33-34页 |
| 2 结果 | 第34-39页 |
| 2.1 目的基因电泳分析 | 第34-35页 |
| 2.2 基因序列分析 | 第35-37页 |
| 2.2.1 flaB 基因序列 | 第35-36页 |
| 2.2.2 FlaB 蛋白氨基酸序列同源性分析 | 第36-37页 |
| 2.3 flaB 的诱导表达 | 第37-39页 |
| 2.3.1 flaB 的诱导表达及表达条件的优化 | 第37-38页 |
| 2.3.2 表达形式的鉴定 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 3.1 目的基因的 PCR 及序列分析 | 第39页 |
| 3.2 表达载体和宿主菌的选择 | 第39-40页 |
| 3.3 表达条件的优化 | 第40页 |
| 4 小结 | 第40-41页 |
| 第3章 重组鞭毛蛋白 FlaB 的多抗制备及免疫原性分析 | 第41-47页 |
| 1 材料与方法 | 第41-43页 |
| 1.1 材料 | 第41页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第41页 |
| 1.1.2 抗原和抗体 | 第41页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第41页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第41页 |
| 1.2 方法 | 第41-43页 |
| 1.2.1 嗜水气单胞菌重组鞭毛蛋白包涵体的提取和纯化 | 第41-42页 |
| 1.2.2 兔抗重组鞭毛蛋白 FlaB 免疫血清的制备 | 第42页 |
| 1.2.3 ELISA 抗体效价测定 | 第42-43页 |
| 1.2.4 Western-blot 试验 | 第43页 |
| 2 结果 | 第43-45页 |
| 2.1 FlaB 蛋白的纯化及鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2 抗血清效价测定及重组蛋白免疫原性分析 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 3.1 包涵体 | 第45-46页 |
| 3.2 抗 FlaB 蛋白血清 | 第46页 |
| 3.3 重组蛋白的免疫原性 | 第46页 |
| 4 小结 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 附录 | 第55-57页 |
| 导师简介 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
