| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-32页 |
| 1 肿瘤 | 第14-15页 |
| 1.1 肿瘤及肿瘤治疗 | 第14页 |
| 1.2 肺癌 | 第14-15页 |
| 2 细胞凋亡 | 第15-21页 |
| 2.1 细胞凋亡概念 | 第15-16页 |
| 2.2 生物学特征 | 第16页 |
| 2.3 分子机制 | 第16-18页 |
| 2.4 细胞凋亡与肿瘤 | 第18-19页 |
| 2.5 caspase与细胞凋亡 | 第19-21页 |
| 3 c-FLIP | 第21-24页 |
| 3.1 肿瘤细胞中的c-FLIP | 第21-22页 |
| 3.2 c-FLIP的作用机制 | 第22页 |
| 3.3 c-FLIP的泛素化降解 | 第22-23页 |
| 3.4 靶向c-FLIP的抗肿瘤药物 | 第23-24页 |
| 4 蛋白质泛素化降解 | 第24-26页 |
| 4.1 泛素蛋白酶体途径 | 第24-26页 |
| 5 泛素连接酶 | 第26-28页 |
| 5.1 含有HECT结构域的E3s | 第27页 |
| 5.2 含有RING指状结构域的E3s | 第27页 |
| 5.3 含有U-box结构域的E3s | 第27-28页 |
| 6 Cullin蛋白家族 | 第28-29页 |
| 6.1 Cullin蛋白复合体的结构 | 第28-29页 |
| 6.2 Neddlation化的cullin家族蛋白 | 第29页 |
| 6.3 Cullin蛋白对底物的识别 | 第29页 |
| 7 BTB蛋白家族 | 第29-32页 |
| 7.1 BTB结构域 | 第29-30页 |
| 7.2 BACK结构域 | 第30页 |
| 7.3 BTB蛋白的分类 | 第30-31页 |
| 7.4 BBP蛋白家族 | 第31-32页 |
| 实验材料和方法 | 第32-52页 |
| 1 实验材料 | 第32页 |
| 2 试剂和耗材 | 第32-33页 |
| 3 仪器设备 | 第33-35页 |
| 4 溶液和试剂配方 | 第35-40页 |
| 4.1 细胞培养所用试剂和配方 | 第35页 |
| 4.2 蛋白裂解所用试剂和配方 | 第35-36页 |
| 4.3 蛋白免疫印迹所用试剂和配方 | 第36-39页 |
| 4.4 质粒转化所用试剂和配方 | 第39页 |
| 4.5 免疫共沉淀所用试剂和配方 | 第39-40页 |
| 5 实验方法 | 第40-52页 |
| 5.1. 细胞培养 | 第40-41页 |
| 5.2 免疫共沉淀实验 | 第41-42页 |
| 5.3 Western Blot检测蛋白变化 | 第42-44页 |
| 5.4 RNAi抑制基因表达 | 第44-45页 |
| 5.5 质粒构建 | 第45-50页 |
| 5.6 质粒转染细胞 | 第50-52页 |
| 实验结果 | 第52-60页 |
| 1 Cisplatin促进c-FLIP-L的降解并升高BTBD6 | 第52页 |
| 2 BTBD6和c-FLIP-L相互结合 | 第52-54页 |
| 2.1 免疫共沉淀验证c-FLIP-L与BTBD6结合在一起 | 第52-53页 |
| 2.2 BTBD6和c-FLIP在细胞内共定位 | 第53-54页 |
| 3. BTBD6能够诱导c-FLIP的降解 | 第54-55页 |
| 3.1 过表达BTBD6能够诱导c-FLIP的降解 | 第54-55页 |
| 3.2 siRNA抑制BTBD6表达,诱导c-FLIP升高 | 第55页 |
| 4. BTBD6促进c-FLIP的泛素化降解 | 第55-57页 |
| 4.1 BTBD6促进c-FLIP蛋白的泛素化 | 第55-56页 |
| 4.2 BTBD6与c-FLIP-L的caspase-like结构域相结合 | 第56-57页 |
| 5. Cullin3与BTBD6促进c-FLIP的泛素化降解及caspase 8的切割 | 第57-60页 |
| 5.1 BTBD6通过BTB结构域与c-FLIP蛋白结合 | 第57-58页 |
| 5.2 Cullin 3与BTBD6相互结合 | 第58-59页 |
| 5.3 Cullin3能促进caspase 8蛋白的切割活化 | 第59-60页 |
| 讨论 | 第60-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第75页 |
