| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-25页 |
| ·前言 | 第9-18页 |
| ·隐孢子虫和隐孢子虫病 | 第9-12页 |
| ·微小隐孢子虫拥有一个高度退化的线粒体(Cpmt) | 第12页 |
| ·微小隐孢子虫中高度退化的线粒体(Cpmt)的功能 | 第12-14页 |
| ·线粒体的呼吸作用和电子转移 | 第13-14页 |
| ·铁硫氧还蛋白的简介 | 第14-17页 |
| ·铁硫氧还蛋白还原酶的组成和结构 | 第17-18页 |
| ·选题意义,目的及研究思路 | 第18-20页 |
| ·参考文献 | 第20-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-38页 |
| ·材料、试剂、基本操作和仪器设备 | 第25-28页 |
| ·分子克隆,点突变相关试剂 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE | 第25-26页 |
| ·菌株,质粒和培养基 | 第26页 |
| ·表达和纯化实验相关试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·实验方法和步骤 | 第28-38页 |
| ·分子生物学实验 | 第28-29页 |
| ·数据挖掘和系统发生树重构 | 第28页 |
| ·克隆CpmtFd全长及其片段至不同载体PCR反应 | 第28-29页 |
| ·CpmtFd和CpmtFNR在孢子虫不同生命阶段的表达水平 | 第29页 |
| ·克隆CpmtFNR全长至不同载体PCR反应 | 第29页 |
| ·酶切、连接、转化和鉴定克隆 | 第29页 |
| ·蛋白表达与纯化 | 第29-34页 |
| ·表达和纯化CpmtFd全长及其各片段 | 第29-32页 |
| ·表达和纯化CpmtFNR全长 | 第32-33页 |
| ·Superdex 200分子筛 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE | 第33-34页 |
| ·蛋白的基本表征 | 第34页 |
| ·蛋白质浓度和纯度的测定 | 第34页 |
| ·HPLC确定FAD在蛋白中的含量 | 第34页 |
| ·CpmtFd以及CpmtFNR的谱学研究 | 第34-35页 |
| ·质谱 | 第34页 |
| ·EPR光谱 | 第34-35页 |
| ·UV-vis光谱 | 第35页 |
| ·CpmtFd以及CpmtFNR生物化学性质研究 | 第35-38页 |
| ·CpmtFNR的NADPH-Fd-cyt c酶活性研究 | 第35-38页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第38-67页 |
| ·生物信息学研究 | 第38-45页 |
| ·前言 | 第38-39页 |
| ·高度各异的mtFd/mtFNR体系 | 第39-40页 |
| ·系统进化树的构建 | 第40-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| ·CpmtFd和CpmtFNR在孢子虫不同生命阶段的表达水平 | 第45-47页 |
| ·蛋白表达与纯化的尝试 | 第47-49页 |
| ·尝试在不同载体中克隆、表达全长CpmtFd蛋白 | 第47-49页 |
| ·尝试在不同载体中克隆、表达全长CpmtFNR蛋白 | 第49-51页 |
| ·尝试在不同载体中克隆、表达一系列CpmtFd片段蛋白以及[2Fe-2S]的组装 | 第51页 |
| ·克隆—系列CpmtFd片段蛋白 | 第51页 |
| ·蛋白表达与纯化部分小节 | 第51-57页 |
| ·铁硫簇的重组 | 第54-57页 |
| ·CpmtFd蛋白的表征 | 第57页 |
| ·CpmtFNR的表征 | 第57-60页 |
| ·CpmtFNR的cytc还原反应动力学研究 | 第60-67页 |
| ·CpmtFNR的cytc还原反应动力学原理 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-67页 |
| 第4章 总结与展望 | 第67-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 在学期间的研究成果及发表的论文 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录A 氨基酸序列 | 第74-75页 |
| A.1 CpmtFd氨基酸序列 | 第74页 |
| A.2 CpmtFNR氨基酸序列 | 第74-75页 |
| 附录B 测序结果 | 第75-78页 |
