| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 中文文摘 | 第7-15页 |
| 绪论 | 第15-25页 |
| 1 癌症及其治疗方法 | 第15-16页 |
| 2 恩度的抗肿瘤机制及临床常见副作用 | 第16-18页 |
| 3 药物评价以及药物评价模型 | 第18-19页 |
| 4 斑马鱼模型在毒理学研究中的优势和应用 | 第19-23页 |
| 5 研究目的及意义 | 第23页 |
| 6 研究内容 | 第23-25页 |
| 第一章 恩度对斑马鱼胚胎心脏的毒性作用 | 第25-45页 |
| 1.1 材料与方法 | 第25-32页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 1.1.1.1 斑马鱼胚胎 | 第25-26页 |
| 1.1.1.2 主要试剂 | 第26页 |
| 1.1.1.3 实验仪器 | 第26页 |
| 1.1.1.4 主要试剂的配制 | 第26-27页 |
| 1.1.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 1.1.2.1 斑马鱼胚胎的培养 | 第27页 |
| 1.1.2.2 恩度对斑马鱼胚胎的致死作用 | 第27-28页 |
| 1.1.2.3 恩度对斑马鱼胚胎的致畸作用 | 第28页 |
| 1.1.2.4 恩度对斑马鱼胚胎心包腔面积的影响 | 第28-29页 |
| 1.1.2.5 恩度对斑马鱼胚胎心脏静脉窦(Sinus Venous)、动脉球(Bulbus Arteriosus)间距的影响 | 第29-30页 |
| 1.1.2.6 恩度对斑马鱼胚胎心率的影响 | 第30页 |
| 1.1.2.7 斑马鱼胚胎病理切片HE染色 | 第30-31页 |
| 1.1.2.8 整体胚胎吖啶橙染色法检测心肌细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 1.1.2.9 数据处理 | 第32页 |
| 1.2 结果与分析 | 第32-42页 |
| 1.2.1 恩度对斑马鱼胚胎的致死作用 | 第32-33页 |
| 1.2.2 恩度对斑马鱼胚胎的致畸作用 | 第33-36页 |
| 1.2.3 恩度对斑马鱼胚胎心包腔面积的影响 | 第36-38页 |
| 1.2.4 恩度对斑马鱼胚胎心脏静脉窦(Sinus Venous)、动脉球(Bulbus Arteriosus)间距的影响 | 第38-39页 |
| 1.2.5 恩度对斑马鱼胚胎心率的影响 | 第39-40页 |
| 1.2.6 斑马鱼胚胎病理切片HE染色 | 第40-41页 |
| 1.2.7 整体胚胎吖啶橙染色法检测心肌细胞凋亡 | 第41-42页 |
| 1.3 小结与讨论 | 第42-45页 |
| 第二章 恩度对成年斑马鱼心脏的毒性作用 | 第45-61页 |
| 2.1 材料与方法 | 第45-52页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第45-47页 |
| 2.1.1.1 斑马鱼 | 第45页 |
| 2.1.1.2 丰年虫卵 | 第45-46页 |
| 2.1.1.3 主要试剂 | 第46页 |
| 2.1.1.4 实验仪器 | 第46页 |
| 2.1.1.5 主要试剂的配制 | 第46-47页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第47-52页 |
| 2.1.2.1 斑马鱼的饲养 | 第47页 |
| 2.1.2.2 丰年虫卵的孵化 | 第47页 |
| 2.1.2.3 斑马鱼成鱼给药方法和给药周期 | 第47-48页 |
| 2.1.2.3 恩度对斑马鱼成鱼死亡率的影响 | 第48页 |
| 2.1.2.4 恩度对斑马鱼成鱼心脏组织形态学的影响 | 第48-50页 |
| 2.1.2.5 恩度对斑马鱼成鱼心脏重量/体重比率的影响 | 第50-51页 |
| 2.1.2.6 恩度对斑马鱼成鱼心肌细胞密度的影响 | 第51页 |
| 2.1.2.7 TUNEL、DAPI双荧光检测心肌细胞凋亡 | 第51-52页 |
| 2.2 结果与分析 | 第52-58页 |
| 2.2.1 恩度对斑马鱼成鱼死亡率的影响 | 第52-53页 |
| 2.2.2 恩度对斑马鱼成鱼心脏组织形态学的影响 | 第53-55页 |
| 2.2.3 恩度对斑马鱼成鱼心脏重量/体重比率的影响 | 第55-56页 |
| 2.2.4 恩度对斑马鱼成鱼心肌细胞密度的影响 | 第56-58页 |
| 2.2.5 TUNEL、DAPI双荧光检测心肌细胞凋亡 | 第58页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第58-61页 |
| 第三章 恩度对成年斑马鱼心脏Bcl-2、Beclin1基因表达水平及Wnt信号通路的影响 | 第61-75页 |
| 3.1 材料与方法 | 第62-67页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第62-63页 |
| 3.1.1.1 斑马鱼 | 第62页 |
| 3.1.1.2 主要试剂 | 第62-63页 |
| 3.1.1.3 实验仪器 | 第63页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第63-67页 |
| 3.1.2.1 分组和给药 | 第63页 |
| 3.1.2.2 引物设计 | 第63-64页 |
| 3.1.2.3 斑马鱼总RNA的提取 | 第64页 |
| 3.1.2.4 总RNA定量分析 | 第64-65页 |
| 3.1.2.5 逆转录合成cDNA | 第65页 |
| 3.1.2.6 cDNA质量检测 | 第65-66页 |
| 3.1.2.7 Real-time qPCR反应体系及反应条件的优化 | 第66页 |
| 3.1.2.8 Real-time qPCR实验 | 第66-67页 |
| 3.2 结果与分析 | 第67-71页 |
| 3.2.1 总RNA的纯度和浓度测定 | 第67-68页 |
| 3.2.2 常规PCR扩增结果 | 第68-69页 |
| 3.2.3 Real-time qPCR反应体系及反应条件的优化 | 第69-70页 |
| 3.2.4 Real-time qPCR检测各基因表达水平变化 | 第70-71页 |
| 3.3 小结与讨诠 | 第71-75页 |
| 第四章 总结与展望 | 第75-79页 |
| 4.1 结论 | 第75-76页 |
| 4.2 不足与展望 | 第76-79页 |
| 附录1 缩写词及其英汉对照表 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 个人简历 | 第93-95页 |
