| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略符号说明 | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-19页 |
| 1.1 抗生素的分类 | 第16页 |
| 1.2 抗生素的作用机制 | 第16页 |
| 1.3 细菌耐药性的分子机制 | 第16-17页 |
| 1.4 抗生素的去除方法 | 第17页 |
| 1.5 实时荧光定量PCR技术 | 第17-18页 |
| 1.6 抗生素含量的测定方法 | 第18页 |
| 1.7 立题依据与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 污水处理厂处理流程中污水总基因组的采集及耐药相关基因的检测 | 第19-29页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.2.1 水样采集 | 第19-20页 |
| 2.2.2 实验试剂与溶液配方 | 第20页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-26页 |
| 2.3.1 样品前处理方法 | 第20-21页 |
| 2.3.2 样品中总基因组的提取 | 第21页 |
| 2.3.3 提取的总基因组DNA质量检测 | 第21-24页 |
| 2.3.4 样品中耐药相关基因的检测 | 第24-25页 |
| 2.3.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第25-26页 |
| 2.4 结果分析 | 第26-27页 |
| 2.4.1 提取总基因组DNA质量的验证 | 第26-27页 |
| 2.4.2 抗生素耐药相关基因的检测 | 第27页 |
| 本章小结 | 第27-29页 |
| 第三章 污水处理厂处理流程中抗生素耐药相关基因的定量分析 | 第29-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 3.1.1 实验样品 | 第29页 |
| 3.1.2 实验试剂与溶剂配方 | 第29-31页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第31页 |
| 3.2 实验步骤 | 第31-36页 |
| 3.2.1 荧光定量PCR标准品的制备 | 第31-34页 |
| 3.2.2 标准曲线绘制 | 第34-35页 |
| 3.2.3 荧光定量PCR定量待测基因 | 第35-36页 |
| 3.3 结果分析 | 第36-43页 |
| 3.3.1 标准曲线和扩增效率 | 第36-37页 |
| 3.3.2 熔解曲线 | 第37-40页 |
| 3.3.3 样品中16S rDNA定量分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 耐药基因和整合酶基因定量分析 | 第41-43页 |
| 本章小结 | 第43-45页 |
| 第四章 污水处理流程中抗生素含量分析 | 第45-55页 |
| 4.1 实验材料和仪器 | 第45-46页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.2 实验试剂及抗生素配制方法 | 第45-46页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第46页 |
| 4.2 实验步骤 | 第46-49页 |
| 4.2.1 固相萃取小柱(SPE)的使用方法 | 第46-47页 |
| 4.2.2 空白加标回收实验 | 第47页 |
| 4.2.3 样品处理 | 第47页 |
| 4.2.4 标准曲线 | 第47页 |
| 4.2.5 上机检测 | 第47-49页 |
| 4.2.6 运行方法 | 第49页 |
| 4.2.7 关机 | 第49页 |
| 4.2.8 数据处理 | 第49页 |
| 4.3 结果分析 | 第49-52页 |
| 4.3.1 标准曲线和加标回收率 | 第49-50页 |
| 4.3.2 检测限和定量限 | 第50-51页 |
| 4.3.3 样品中抗生素的含量 | 第51-52页 |
| 4.3.4 抗生素耐药基因浓度和抗生素浓度之间的关系 | 第52页 |
| 本章小结 | 第52-55页 |
| 第五章 微生物降解抗生素的初步研究 | 第55-67页 |
| 5.1 实验材料和方法 | 第55-57页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第55页 |
| 5.1.2 实验试剂及配置方法 | 第55-57页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第57页 |
| 5.2 实验方法 | 第57-61页 |
| 5.2.1 菌种的筛选 | 第57页 |
| 5.2.2 抗生素降解率的检测 | 第57-58页 |
| 5.2.3 检测标准曲线的制备 | 第58页 |
| 5.2.4 数据分析 | 第58-59页 |
| 5.2.5 降解曲线的制作 | 第59页 |
| 5.2.6 能够降解抗生素物质的定位 | 第59-60页 |
| 5.2.7 药敏试验——K-B琼脂扩散法 | 第60-61页 |
| 5.3 分析与讨论 | 第61-65页 |
| 5.3.1 头孢氨苄的液相标准曲线 | 第61-62页 |
| 5.3.2 降解菌株的筛选 | 第62页 |
| 5.3.3 降解曲线的制作 | 第62-63页 |
| 5.3.4 降解抗生素物质的定位 | 第63-64页 |
| 5.3.5 药敏试验结果 | 第64-65页 |
| 5.3.6 抗生素降解产物初步分析 | 第65页 |
| 本章小结 | 第65-67页 |
| 第六章 全文总结 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 已发表文章 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第77页 |
