摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第11-18页 |
1.白色念珠菌简介 | 第11-13页 |
1.1 白色念珠菌病流行趋势 | 第11页 |
1.2 白色念珠菌感染临床现状 | 第11-12页 |
1.3 白色念珠菌检测研究 | 第12页 |
1.4 白色念珠菌诊断标志物 | 第12-13页 |
2.噬菌体展示技术 | 第13-16页 |
2.1 丝状噬菌体 | 第13页 |
2.2 噬菌体展示技术原理 | 第13页 |
2.3 丝状噬菌体展示系统 | 第13-15页 |
2.4 噬菌体展示系统常用的载体 | 第15-16页 |
2.5 噬菌体展示技术的优点 | 第16页 |
2.6 噬菌体展示技术的应用 | 第16页 |
3.本研究的意义和内容 | 第16-18页 |
3.1 研究路线 | 第16页 |
3.2 研究内容 | 第16-17页 |
3.3 研究意义 | 第17-18页 |
实验材料与仪器 | 第18-23页 |
1.菌种与载体 | 第18页 |
2.主要试剂和器材 | 第18-19页 |
2.1 主要试剂 | 第18-19页 |
2.2 实验仪器 | 第19页 |
3.实验试剂配方 | 第19-22页 |
3.1 培养基 | 第19-20页 |
3.2 DNA琼脂糖凝胶电泳相关试剂配方 | 第20页 |
3.3 蛋白胶溶液配方 | 第20-21页 |
3.4 噬菌体胶溶液配方 | 第21页 |
3.5 WesternBlotting溶液配方 | 第21页 |
3.6 银染溶液配方 | 第21页 |
3.7 蛋白制备和纯化溶液配方 | 第21-22页 |
3.8 ELISA相关溶液配方 | 第22页 |
4.人血清样品 | 第22页 |
5.引物合成、测序公司 | 第22-23页 |
实验方法和步骤 | 第23-30页 |
1.重组蛋白Fba1的制备及抗原性验证 | 第23-24页 |
1.1 重组蛋白Fba1条件的确立 | 第23页 |
1.2 Fba1重组蛋白的纯化 | 第23页 |
1.3 SDS-PAGE凝胶电泳验证 | 第23-24页 |
1.4 重组蛋白Fba1抗原性验证 | 第24页 |
2.重组噬菌体F-phage、phage-H的制备及免疫原性的验证 | 第24-26页 |
2.1 展示Fba1蛋白表位的pVIII单展示噬菌体的构建 | 第24-26页 |
2.2 噬菌体F-phage和phage-H的制备 | 第26页 |
3.F-phage-H载体的制备及抗原性验证 | 第26-28页 |
3.1 F-phage-H 载体的构建 | 第26-28页 |
3.2 F-phage-H的制备 | 第28页 |
4.噬菌体银染和抗原性验证 | 第28页 |
4.1 噬菌体银染 | 第28页 |
4.2 F-phage、phage-H和F-phage-H噬菌体的抗原性验证 | 第28页 |
5.血清学检测 | 第28-30页 |
5.1 棋盘滴定法选择最佳的滴定条件 | 第28-29页 |
5.2 四种检测试剂间接ELISA法血清学检测 | 第29-30页 |
实验结果与讨论 | 第30-39页 |
1.重组蛋白Fba1的制备 | 第30-31页 |
1.1 重组蛋白Fba1IPTG诱导条件的确立 | 第30页 |
1.2 Fba1重组蛋白的制备和纯化 | 第30-31页 |
1.3 WesternBlotting鉴定Fba1重组蛋白的抗原性 | 第31页 |
2.噬菌体检测试剂的制备及抗原性验证 | 第31-34页 |
2.1 噬菌体的制备 | 第31-33页 |
2.2 噬菌体银染 | 第33页 |
2.3 F-phage、phage-H和F-phage-H的WesternBlotting抗原性验证 | 第33-34页 |
3.血清学检测 | 第34-38页 |
3.1 间接ELISA法用棋盘滴定法选择最佳的滴定条件 | 第34-36页 |
3.2 对144例健康人血清进行间接ELISA法检测研究 | 第36页 |
3.3 癌症患者血清间接ELISA法检测 | 第36-38页 |
4.结论 | 第38-39页 |
讨论 | 第39-40页 |
主要结论和和创新点 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
发表论文及参加项目情况 | 第46页 |