| 中文摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-20页 |
| 1.1 细胞信号转导 | 第7-8页 |
| 1.2 Ras | 第8-9页 |
| 1.3 酿酒酵母细胞Ras-cAMP 信号通路 | 第9-15页 |
| 1.3.1 Ras 蛋白 | 第9-10页 |
| 1.3.2 Cdc25 与Sdc25 | 第10-11页 |
| 1.3.3 Ira1与Ira2 | 第11-12页 |
| 1.3.4 Cdc35/Cy11 | 第12-13页 |
| 1.3.5 Cap/Srv2 | 第13-14页 |
| 1.3.6 Pde1 和Pde2 | 第14-15页 |
| 1.4 Ras-cAMP 信号通路主要靶标—cAMP 依赖性蛋白激酶PKA | 第15-17页 |
| 1.5 酿酒酵母Ras－cAMP 信号通路的负反馈抑制作用 | 第17-18页 |
| 1.6 Ras-cAMP 信号通路、PKA 活性与细胞的胁迫抗性 | 第18页 |
| 1.7 本研究的目的和内容 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-25页 |
| 2.1.1 质粒、菌株与引物 | 第20-21页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-36页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第25-27页 |
| 2.2.2 大肠杆菌质粒提取方法（CTAB 法） | 第27页 |
| 2.2.3 酵母细胞染色体快速分离 | 第27-28页 |
| 2.2.4 PCR 扩增反应 | 第28页 |
| 2.2.5 DNA 限制酶切 | 第28-29页 |
| 2.2.6 DNA 连接反应 | 第29页 |
| 2.2.7 DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
| 2.2.8 琼脂糖凝胶回收DNA | 第30页 |
| 2.2.9 酵母细胞的转化 | 第30-32页 |
| 2.2.10 酵母细胞质粒回收 | 第32页 |
| 2.2.11 质粒缺口修复（Gap-repair） | 第32-33页 |
| 2.2.12 梯度稀释实验方法 | 第33页 |
| 2.2.13 酵母热击实验方法 | 第33-34页 |
| 2.2.14 mTn 诱变文库的转化 | 第34-35页 |
| 2.2.15 整合质粒的回收 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-55页 |
| 3.1 概述 | 第36页 |
| 3.2 mTn 突变文库的转化与突变株的筛选 | 第36-40页 |
| 3.3 热击抗性增强菌株突变定位 | 第40-46页 |
| 3.4 回复突变株表型验证 | 第46-55页 |
| 3.4.1 质粒YCp33TIM9 与YCp33ULP2 的构建 | 第46-52页 |
| 3.4.2 热击实验 | 第52-55页 |
| 第四章 总结与展望 | 第55-57页 |
| 4.1 工作总结 | 第55页 |
| 4.2 工作展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
