| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 课题的提出 | 第12页 |
| 1.2 低温对植物体生理生化的影响 | 第12-15页 |
| 1.2.1 植物生物膜系统与抗寒性的关系 | 第12-13页 |
| 1.2.2 膜保护酶系统的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.3 低温对植物体光合作用的影响 | 第14-15页 |
| 1.3 番茄低温胁迫研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 候选基因 | 第16-20页 |
| 1.4.1 牻牛儿基牻牛儿基二磷酸还原酶 | 第16-17页 |
| 1.4.2 木葡聚糖内糖基转移酶 | 第17-18页 |
| 1.4.3 韧皮部蛋白 | 第18-19页 |
| 1.4.4 NAC转录因子 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的与内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-26页 |
| 2.1 植物材料及菌株、质粒 | 第21页 |
| 2.2 试剂与引物 | 第21-22页 |
| 2.2.1 相关试剂 | 第21页 |
| 2.2.2 基因引物 | 第21-22页 |
| 2.3 番茄植株的遗传转化 | 第22-23页 |
| 2.4 番茄转基因植株的PCR阳性检测 | 第23页 |
| 2.5 转基因植株相对表达量的检测 | 第23-24页 |
| 2.6 目的基因的组织表达谱分析 | 第24页 |
| 2.7 T_1代转基因植株的遗传分析 | 第24页 |
| 2.8 转基因植株与非转基因植株的表型观察 | 第24页 |
| 2.9 转基因植株苗期抗逆性试验 | 第24-26页 |
| 2.9.1 转基因植株苗期抗寒性分析 | 第24-25页 |
| 2.9.1.1 T_1代转基因植株苗期冷害指数调查 | 第24-25页 |
| 2.9.1.2 叶片伤害率计算 | 第25页 |
| 2.9.1.3 丙二醛含量的测定 | 第25页 |
| 2.9.2 转基因植株抗盐性分析 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-39页 |
| 3.1 转基因植株的获得 | 第26-27页 |
| 3.2 转基因植株的阳性检测 | 第27-28页 |
| 3.3 转基因植株的表达量分析 | 第28-30页 |
| 3.3.1 转GGR基因植株的表达量分析 | 第28页 |
| 3.3.2 转XTH3基因植株的表达量分析 | 第28-29页 |
| 3.3.3 转P-p基因植株的表达量分析 | 第29页 |
| 3.3.4 转NAC2基因植株的表达量分析 | 第29-30页 |
| 3.4 目的基因的组织表达谱分析 | 第30-31页 |
| 3.5 转基因T_1代植株的初步功能鉴定 | 第31-39页 |
| 3.5.1 转基因T_1代植株的遗传分析 | 第31-33页 |
| 3.5.2 转GGR基因T_1代植株的表型观察 | 第33页 |
| 3.5.3 转基因植株苗期抗寒性分析 | 第33-37页 |
| 3.5.3.1 4℃低温处理下转基因植株的变化情况 | 第33-34页 |
| 3.5.3.2 4℃低温处理下转基因植株苗期冷害指数调查 | 第34-35页 |
| 3.5.3.3 4℃低温处理下转基因植株叶片伤害率的变化 | 第35-36页 |
| 3.5.3.4 4℃低温处理下转基因植株叶片丙二醛含量的测定 | 第36-37页 |
| 3.5.4 转基因植株耐盐性分析 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-43页 |
| 4.1 超量表达GGR基因的功能分析 | 第39-40页 |
| 4.2 超量表达XTH3基因的功能分析 | 第40-41页 |
| 4.3 通过转Phloem protein和NAC2基因提高植株抗寒性可行性分析 | 第41-43页 |
| 5 后续工作与展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 附录一: 质粒的小量提取方法 | 第51页 |
| 附录二: 小量法提取植物叶片DNA | 第51-52页 |
| 附录三: Trizol法提取植物总RNA | 第52-53页 |
| 附录四: 反转录RNA获得cDNA第一条链 | 第53页 |
