中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
前言 | 第10-12页 |
一、miR-200a在SGC7901胃腺癌细胞系中表达的调控及其功能的体外研究 | 第12-32页 |
1.1 引言 | 第12-14页 |
1.2 材料和方法 | 第14-22页 |
1.2.1 主要实验试剂与仪器 | 第14-15页 |
1.2.2 细胞培养 | 第15页 |
1.2.3 细胞转染 | 第15-16页 |
1.2.4 miRNA实时荧光定量PCR | 第16-18页 |
1.2.5 流式细胞术分析细胞周期 | 第18-19页 |
1.2.6 MTT(噻唑兰比色分析)法分析细胞增殖活性 | 第19-20页 |
1.2.7 细胞侵袭迁移能力检测 | 第20-21页 |
1.2.8 统计学处理 | 第21-22页 |
1.3 结果 | 第22-28页 |
1.3.1 微量紫外/可见分光光度计测定总RNA的浓度 | 第22页 |
1.3.2 琼脂糖凝胶电泳观察总RNA | 第22-23页 |
1.3.3 miRNA实时荧光定量PCR | 第23-24页 |
1.3.4 流式细胞术分析细胞周期 | 第24-25页 |
1.3.5 MTT(噻唑兰比色分析)法分析细胞增殖率 | 第25-26页 |
1.3.6 Transwell体外侵袭实验 | 第26-27页 |
1.3.7 “划痕”迁移实验 | 第27-28页 |
1.4 讨论 | 第28-31页 |
1.5 小结 | 第31-32页 |
二、miR-200a对Wnt/β-catenin通路的调控及靶基因CTNNB1的鉴定 | 第32-60页 |
2.1 引言 | 第32-33页 |
2.2 材料和方法 | 第33-44页 |
2.2.1 主要实验试剂与仪器 | 第33-34页 |
2.2.2 细胞培养 | 第34页 |
2.2.3 细胞转染 | 第34-35页 |
2.2.4 Western blot检测蛋白表达 | 第35-38页 |
2.2.5 TOP/FOP荧光素酶试验方法 | 第38页 |
2.2.6 免疫荧光 | 第38-39页 |
2.2.7 miR-200a基因靶点CTNNB1的预测 | 第39页 |
2.2.8 荧光素酶报告质粒的构建 | 第39-43页 |
2.2.9 荧光素酶活性实验 | 第43页 |
2.2.10 统计学处理 | 第43-44页 |
2.3 结果 | 第44-53页 |
2.3.1 调控miR-200a的表达对Wnt/β-catenin通路转录活性及相关蛋白的表达影响 | 第44-49页 |
2.3.2 miR-200a靶基因CTNNB1的鉴定及相关实验 | 第49-53页 |
2.4 讨论 | 第53-59页 |
2.5 小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第65-66页 |
综述 | 第66-75页 |
综述参考文献 | 第71-75页 |
致谢 | 第75页 |