| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第1章 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 脑膜炎的危害、血清型及分布 | 第12-13页 |
| 1.1.1 脑膜炎的危害 | 第12页 |
| 1.1.2 脑膜炎的血清型及分布 | 第12-13页 |
| 1.2 脑膜炎疫苗的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 脑膜炎ACWY多糖疫苗研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2.2 脑膜炎ACWY多糖结合疫苗研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 脑膜炎B（MenB）的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 MenB多糖结合疫苗的研究进展 | 第15页 |
| 1.3.2 MenB蛋白疫苗的研究进展和策略 | 第15-18页 |
| 1.4 植物反应器的优势及其主要产品 | 第18-21页 |
| 1.4.1 植物生物反应器的优势 | 第18-20页 |
| 1.4.2 植物生物反应器的主要产品 | 第20-21页 |
| 1.5 植物生物反应器中外源蛋白的表达方法 | 第21-24页 |
| 1.5.1 稳定核转化 | 第21-22页 |
| 1.5.2 瞬时转化 | 第22-23页 |
| 1.5.3 叶绿体转化 | 第23-24页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 第2章 B群脑膜炎外膜蛋白fHbp在原核中的表达研究 | 第26-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-30页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第26页 |
| 2.1.2 工具酶与试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.3 母液和缓冲液 | 第27-30页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-43页 |
| 2.2.1 fHbp基因的克隆与生物信息学分析 | 第30-33页 |
| 2.2.2 原核表达载体pET-22b-fHbp的构建 | 第33-38页 |
| 2.2.3 fHbp的原核表达条件优化 | 第38-40页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE | 第40-41页 |
| 2.2.5 fHbp的定量检测 | 第41-42页 |
| 2.2.6 fHbp的纯化 | 第42-43页 |
| 2.3 结果 | 第43-49页 |
| 2.3.1 fHbp基因的克隆 | 第43页 |
| 2.3.2 fHbp原核表达载体的构建 | 第43-48页 |
| 2.3.4 fHbp的定量 | 第48页 |
| 2.3.5 fHbp的纯化 | 第48-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-52页 |
| 第3章 脑膜炎抗原蛋白fHbp在拟南芥中的表达研究 | 第52-94页 |
| 3.1 实验材料 | 第52-57页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 3.1.2 质粒和菌种 | 第52-53页 |
| 3.1.3 工具酶与试剂 | 第53页 |
| 3.1.4 培养基及缓冲液配制 | 第53-56页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第56-57页 |
| 3.2 实验方法 | 第57-78页 |
| 3.2.1 植物表达载体pPhaP3301-rfHbp的构建 | 第57-64页 |
| 3.2.2 拟南芥转化与筛选 | 第64-66页 |
| 3.2.3 转化拟南芥的分子检测 | 第66-76页 |
| 3.2.4 fHbp的表达量分析 | 第76-78页 |
| 3.3 结果 | 第78-89页 |
| 3.3.1 菜豆贮藏蛋白启动子PhaP的克隆 | 第78-79页 |
| 3.3.2 菜豆贮藏蛋白启动子PhaP的测序分析 | 第79-80页 |
| 3.3.3 fHbp编码基因的密码子优化设计 | 第80-81页 |
| 3.3.4 载体pPhaP3301-rfHbp的构建 | 第81-83页 |
| 3.3.5 拟南芥转基因植株的获得 | 第83-84页 |
| 3.3.6 抗性拟南芥的分子检测 | 第84-88页 |
| 3.3.7 rfHbp的纯化 | 第88-89页 |
| 3.4 讨论 | 第89-94页 |
| 第4章 脑膜炎抗原蛋白fHbp的免疫学研究 | 第94-106页 |
| 4.1 实验材料 | 第94-95页 |
| 4.1.1 菌株和小鼠 | 第94页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第94页 |
| 4.1.3 实验所需溶液的配制 | 第94-95页 |
| 4.1.4 实验所需主要仪器 | 第95页 |
| 4.2 实验方法 | 第95-100页 |
| 4.2.1 免疫制剂的制备 | 第95-96页 |
| 4.2.2 fHbp免疫小鼠、血清及粪便样本的收集 | 第96-97页 |
| 4.2.3 血清IgG的ELISA检测 | 第97-98页 |
| 4.2.4 粘膜IgA的ELISA检测 | 第98-99页 |
| 4.2.5 SBA的ELISA检测 | 第99-100页 |
| 4.2.6 小鼠的攻毒实验 | 第100页 |
| 4.3 结果 | 第100-104页 |
| 4.3.1 小鼠血清的IgG的滴度 | 第100-101页 |
| 4.3.2 小鼠粘膜IgA的滴度 | 第101-102页 |
| 4.3.3 乳兔补体SBA的检测 | 第102-103页 |
| 4.3.4 攻毒试验 | 第103-104页 |
| 4.4 讨论 | 第104-106页 |
| 结论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-126页 |
| 在校期间发表的学术论文 | 第126-128页 |
| 致谢 | 第128-130页 |
| 附录 | 第130页 |
