| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 微藻生物应用概况 | 第9页 |
| 1.2 微藻油脂调控机制 | 第9-16页 |
| 1.2.1 糖代谢相关酶基因 | 第10-12页 |
| 1.2.2 蛋白质代谢相关酶基因 | 第12页 |
| 1.2.3 脂代谢相关酶 | 第12-15页 |
| 1.2.4 转录因子 | 第15-16页 |
| 1.3 微藻碳流量分配机制研究 | 第16-21页 |
| 1.3.1 基于组学技术的微藻油脂代谢网络研究 | 第16-21页 |
| 1.3.1.1 基因组学 | 第16-18页 |
| 1.3.1.2 蛋白质组学 | 第18-20页 |
| 1.3.1.3 代谢组学 | 第20-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第21页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-29页 |
| 2.2.1 小球藻纯化 | 第22-23页 |
| 2.2.1.1 藻种培养 | 第22页 |
| 2.2.1.2 藻种纯化 | 第22页 |
| 2.2.1.3 藻株无菌检测 | 第22-23页 |
| 2.2.2 N处理 | 第23页 |
| 2.2.2.1 全N和N限制小球藻培养 | 第23页 |
| 2.2.2.2 藻细胞油脂检测 | 第23页 |
| 2.2.2.3 生长分析 | 第23页 |
| 2.2.3 RNA提取 | 第23-25页 |
| 2.2.3.1 试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.2.3.2 提取步骤 | 第24页 |
| 2.2.3.3 消化DNA | 第24页 |
| 2.2.3.4 cDNA合成 | 第24-25页 |
| 2.2.4 转录组测序 | 第25页 |
| 2.2.4.1 mRNA文库构建 | 第25页 |
| 2.2.4.2 测序数据去杂统计 | 第25页 |
| 2.2.4.3 功能注释及差异表达分析 | 第25页 |
| 2.2.5 相对荧光定量PCR | 第25页 |
| 2.2.6 绝对荧光定量PCR | 第25-29页 |
| 2.2.6.1 培养基及缓冲液配制 | 第25-26页 |
| 2.2.6.2 引物设计 | 第26页 |
| 2.2.6.3 PCR扩增 | 第26页 |
| 2.2.6.4 PCR产物回收 | 第26-27页 |
| 2.2.6.5 目的序列克隆 | 第27页 |
| 2.2.6.6 目的基因质粒提取 | 第27页 |
| 2.2.6.7 引物熔解曲线分析 | 第27-28页 |
| 2.2.6.8 荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第28页 |
| 2.2.6.9 样本目的基因荧光定量PCR检测表达 | 第28页 |
| 2.2.6.10 数据处理 | 第28-29页 |
| 第3章 结果与分析 | 第29-44页 |
| 3.1 小球藻纯化结果分析 | 第29-30页 |
| 3.2 N处理对小球藻生长影响 | 第30-31页 |
| 3.3 小球藻转录组测序及分析 | 第31-38页 |
| 3.3.1 RNA提取质量 | 第31-32页 |
| 3.3.2 转录组测序数据分析 | 第32-33页 |
| 3.3.3 功能注释及差异表达分析 | 第33-35页 |
| 3.3.4 关键基因差异表达分析 | 第35-38页 |
| 3.4 N限制下小球藻油脂代谢相关基因的表达分析 | 第38-44页 |
| 3.4.2 PCR产物回收结果 | 第38页 |
| 3.4.3 重组子检测 | 第38-39页 |
| 3.4.4 引物熔解曲线 | 第39-40页 |
| 3.4.5 标准曲线绘制 | 第40-41页 |
| 3.4.6 小球藻基因表达量的变化 | 第41-44页 |
| 第4章 讨论 | 第44-51页 |
| 4.1 小球藻纯化 | 第44页 |
| 4.2 N限制对小球藻的生长和油脂积累的影响 | 第44-45页 |
| 4.3 N限制对小球藻基因表达影响 | 第45-51页 |
| 4.3.1 转录组结果分析 | 第45页 |
| 4.3.2 蛋白质代谢相关基因 | 第45-47页 |
| 4.3.3 糖代谢相关基因 | 第47-48页 |
| 4.3.4 脂肪代谢关键基因: | 第48-49页 |
| 4.3.5 三羧酸循环关键基因 | 第49页 |
| 4.3.6 生长相关关键基因 | 第49页 |
| 4.3.7 光合作用和光合色素相关基因 | 第49-50页 |
| 4.3.8 周质蛋白基因(PBP) | 第50-51页 |
| 第5章 结论 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 缩略语表 | 第60-61页 |
| 攻读硕士研究生期间发表论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |