| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·杆状病毒概述 | 第10-11页 |
| ·HearNPV 基因组研究概况 | 第11-14页 |
| ·杆状病毒基因组研究进展 | 第11-13页 |
| ·HearNPV 基因组研究进展 | 第13-14页 |
| ·HearNPV 基因研究概况 | 第14-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-23页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·病毒、菌种、细胞和昆虫 | 第18页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第18页 |
| ·其他试剂 | 第18页 |
| ·引物设计 | 第18-19页 |
| ·ORF83 和 ORF86 克隆引物 | 第18-19页 |
| ·同源重组片段引物 | 第19页 |
| ·重组鉴定引物 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-23页 |
| ·PCR 反应 | 第19-20页 |
| ·酶切反应 | 第20页 |
| ·T4 连接酶连接反应 | 第20页 |
| ·目的片段分离回收 | 第20页 |
| ·用氯化钙制备和转化感受态细胞 | 第20页 |
| ·质粒DNA 的小量制备 | 第20页 |
| ·SDS-PAGE 电泳与 Western Blot | 第20页 |
| ·ORF83 基因表达载体的构建 | 第20页 |
| ·ORF86 基因表达载体的构建 | 第20页 |
| ·ORF83 和 ORF86 基因在大肠杆菌中表达 | 第20页 |
| ·ORF83 和 ORF86 融合蛋白的纯化 | 第20页 |
| ·多克隆抗体的制备与效价测定 | 第20-21页 |
| ·电转化感受态细胞的制备 | 第21页 |
| ·同源重组电转化感受态细胞的制备 | 第21页 |
| ·电转化感受态细胞的方法 | 第21页 |
| ·HearNPV Bacmid 基因组的提取 | 第21页 |
| ·HearNPV Bacmid 基因组的酶切鉴定 | 第21-22页 |
| ·常规实验试剂配置 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与分析 | 第23-33页 |
| ·HearNPV ORF83 和ORF86 的原核表达 | 第23-25页 |
| ·ORF83 基因的克隆与表达载体构建 | 第23页 |
| ·ORF86 基因的克隆与表达载体构建 | 第23-24页 |
| ·pET-32a-ORF83 在BL21(DE3)中的表达 | 第24-25页 |
| ·pGEX-4T2-ORF86 在BL21 中的表达 | 第25页 |
| ·HearNPV ORF83 和ORF86 的多克隆抗体制备 | 第25-26页 |
| ·ORF83 基因多克隆抗体的效价测定 | 第25-26页 |
| ·ORF86 基因多克隆抗体的效价测定 | 第26页 |
| ·ORF86 多克隆抗体特异性的Western Blot 检测 | 第26页 |
| ·HearNPV ORF83 和ORF86 的基因敲除重组Bacmid 构建 | 第26-33页 |
| ·含有同源重组系统的H28 构建 | 第26-27页 |
| ·ORF83 和ORF86 同源重组片段的扩增 | 第27-28页 |
| ·ORF83 基因缺失Bacmid 基因组的鉴定 | 第28-30页 |
| ·ORF86 基因缺失Bacmid 基因组的鉴定 | 第30-33页 |
| 第四章 结论 | 第33-34页 |
| 第五章 讨论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 作者简介 | 第39页 |
