摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
符号及缩略语 | 第13-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-28页 |
第一章 猪卵母细胞减数分裂成熟与Aurora-A的作用 | 第14-28页 |
1 卵母细胞减数分裂成熟 | 第14-22页 |
1.1 卵母细胞周期 | 第14-15页 |
1.2 卵母细胞减数分裂停滞与恢复 | 第15-16页 |
1.3 双极纺锤体组装 | 第16-18页 |
1.4 纺锤体运动的分子作用力 | 第18-20页 |
1.5 纺锤体检验点 | 第20-22页 |
2 Aurora-A及相关调控因子 | 第22-28页 |
2.1 Aurora激酶家族 | 第22-24页 |
2.3 Aurora-A的激活 | 第24页 |
2.4 Aurora-A参与细胞分裂的机制 | 第24-27页 |
2.5 Aurora-A在减数分裂中的作用 | 第27-28页 |
第二部分 试验研究 | 第28-64页 |
第二章 Aurora-A在猪卵母细胞的表达与定位 | 第28-42页 |
1 试验材料 | 第29-33页 |
1.1 主要仪器设备 | 第29-30页 |
1.2 抗体及试剂 | 第30-31页 |
1.3 抗体和试剂的配制 | 第31-33页 |
2 方法 | 第33-37页 |
2.1 猪卵母细胞采集与成熟培养 | 第33页 |
2.2 蛋白免疫印迹( western blot) | 第33-35页 |
2.3 荧光染色与激光共聚焦观察 | 第35-36页 |
2.4 数据分析 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-39页 |
3.1 Aurora-A在猪卵母细胞成熟过程中的表达 | 第37页 |
3.2 Aurora-A在猪卵母细胞成熟过程中的定位 | 第37-38页 |
3.3 Aurora-A与α-tubulin的共定位 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-40页 |
4.1 猪卵母细胞成熟分裂过程中Aurora-A蛋白表达的变化 | 第39-40页 |
4.2 猪卵母细胞成熟分裂过程中的Aurora-A的亚细胞定位 | 第40页 |
5 小结 | 第40-42页 |
第三章 Aurora-A在猪卵母细胞的功能作用 | 第42-54页 |
1 试验材料 | 第43-44页 |
1.1 主要仪器设备 | 第43页 |
1.2 抗体和试剂 | 第43页 |
1.3 抗体和试剂的配制 | 第43-44页 |
2 方法 | 第44-46页 |
2.1 猪卵母细胞分离与成熟培养 | 第44-45页 |
2.2 猪卵母细胞体外孤雌激活 | 第45页 |
2.3 MLN8054处理猪卵母细胞 | 第45页 |
2.4 免疫荧光染色和激光共聚焦观察 | 第45-46页 |
2.5 试验设计 | 第46页 |
2.6 数据分析 | 第46页 |
3 结果 | 第46-50页 |
3.1 Aurora-A抑制对猪卵母细胞成熟的影响 | 第46-48页 |
3.2 MLN8054对猪卵母细胞成熟分裂进程的影响 | 第48-49页 |
3.3 抑制Aurora-A对猪MI期卵母细胞纺锤体结构及染色体排列的影响 | 第49-50页 |
3.4 MLN8054对猪卵母细胞孤雌胚胎发育的影响 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
4.1 Aurora-A抑制对猪卵母细胞成熟的影响 | 第50-51页 |
4.2 Aurora-A抑制对卵母细胞纺锤体组装和染色体排列的影响 | 第51-52页 |
4.3 抑制猪卵母细胞Aurora-A表达对孤雌胚胎发育的影响 | 第52页 |
5 小结 | 第52-54页 |
第四章 Aurora-A参与猪卵母细胞减数分裂的机制 | 第54-64页 |
1 试验材料 | 第55页 |
1.1 主要仪器设备 | 第55页 |
1.2 抗体和试剂 | 第55页 |
2 方法 | 第55-59页 |
2.1 猪卵母细胞采集与成熟培养 | 第55-56页 |
2.2 MLN8054处理猪卵母细胞 | 第56页 |
2.3 荧光染色与激光共聚焦观察 | 第56-57页 |
2.4 Western blot | 第57-58页 |
2.5 免疫印迹蛋白强度分析 | 第58页 |
2.6 数据分析 | 第58页 |
2.7 试验设计 | 第58-59页 |
3 结果 | 第59-61页 |
3.1 MLN8054处理对Pro-MI期猪卵母细胞p-Aurora-A蛋白表达的影响 | 第59-60页 |
3.2 Aurora-A抑制对猪减数分裂卵母细胞p-TACC3蛋白表达的影响 | 第60-61页 |
3.3 Aurora-A抑制对猪卵母细胞减数分裂中p-TACC3蛋白定位的影响 | 第61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
4.1 Aurora-A活化需要自身基团的磷酸化作用 | 第61-62页 |
4.2 Aurora-A通过调控TACC3磷酸化水平影响猪卵母细胞减数分裂纺锤体的组装 | 第62-63页 |
5 小结 | 第63-64页 |
全文结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-80页 |
致谢 | 第80页 |