| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 绪论 | 第11-14页 |
| 第一部分 转基因细胞模型L02-HBx的构建与鉴定 | 第14-30页 |
| 一、材料 | 第14页 |
| 1. 质粒和细胞 | 第14页 |
| 2. 菌株 | 第14页 |
| 3. 生化试剂 | 第14页 |
| 4. 主要设备 | 第14页 |
| 二、实验方法 | 第14-18页 |
| 1. 重组载体的构建与鉴定 | 第14-15页 |
| 2. pLVX-HBx转化DH5α、提取以及鉴定 | 第15页 |
| 3. 质粒大量抽提 | 第15页 |
| 4. 293T细胞培养与病毒生产 | 第15-16页 |
| 5. 嘌呤霉素筛选和阳性克隆的获取 | 第16-17页 |
| 6. 阳性克隆的鉴定 | 第17-18页 |
| 三、实验结果 | 第18-25页 |
| 1. 重组质粒pLVX-HBx的鉴定 | 第18-22页 |
| 2. 嘌呤霉素最低致死浓度的确定 | 第22页 |
| 3. 阳性克隆的筛选 | 第22页 |
| 4. 阳性克隆的鉴定 | 第22-25页 |
| 四、讨论 | 第25-28页 |
| 五、小结 | 第28-30页 |
| 第二部分 IL-6干预下HBx调控L02细胞增殖的研究 | 第30-42页 |
| 一、材料 | 第30页 |
| 1. 细胞 | 第30页 |
| 2. 生化试剂 | 第30页 |
| 3. 主要设备 | 第30页 |
| 二、实验方法 | 第30-31页 |
| 1. 倒置相差显微镜观察各组L02-HBx细胞的形态学特点 | 第30页 |
| 2. WST-8法检测IL-6培养后L02-HBx细胞的增殖 | 第30-31页 |
| 3. 流式细胞仪检测IL-6培养后各组细胞的凋亡及细胞周期 | 第31页 |
| 三、实验结果 | 第31-34页 |
| 1. L02-HBx的形态学改变 | 第31-32页 |
| 2. IL-6干预后WTS法检测各组细胞的增殖 | 第32-33页 |
| 3. IL-6干预后流式细胞仪检测L02-HBx细胞的增殖及细胞周期 | 第33-34页 |
| 四、统计学分析 | 第34页 |
| 五、讨论 | 第34-41页 |
| 六、小结 | 第41-42页 |
| 结论与展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录A | 第56-57页 |
| 附录B | 第57-64页 |
