| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一部分 免疫共沉淀结合质谱法寻找B7-H4分子相互作用蛋白及其生物学功能的初步研究 | 第12-29页 |
| 1 材料 | 第12-14页 |
| 1.1 主要试剂 | 第12-13页 |
| 1.2 主要溶液的配置 | 第13-14页 |
| 1.3 实验仪器 | 第14页 |
| 1.4 实验细胞、质粒及菌株 | 第14页 |
| 2 实验方法 | 第14-20页 |
| 2.1 细胞培养 | 第14-15页 |
| 2.2 重组Flag标签质粒载体的构建 | 第15-17页 |
| 2.3 重组质粒瞬转HEK293细胞 | 第17页 |
| 2.4 免疫共沉淀（CoIP）寻找相互作用蛋白 | 第17-18页 |
| 2.5 银染法寻找B7-H4相互作用蛋白 | 第18页 |
| 2.6 差异蛋白胶内酶解 | 第18-19页 |
| 2.7 慢病毒法构建B7-H4稳转细胞株 | 第19页 |
| 2.8 嘌呤霉素最适作用浓度的筛选 | 第19页 |
| 2.9 博来霉素zeocin作用浓度的筛选 | 第19-20页 |
| 3 实验结果 | 第20-26页 |
| 3.1 pCMV-Tag2B-B7-H4 WT重组质粒的鉴定 | 第20-21页 |
| 3.2 免疫共沉淀（CoIP）结果 | 第21-22页 |
| 3.3 差异条带银染结果 | 第22页 |
| 3.4 质谱结果 | 第22-23页 |
| 3.5 免疫共沉淀验证相互作用 | 第23页 |
| 3.6 稳转细胞株的构建 | 第23-25页 |
| 3.7 博来霉素zeocin作用浓度的确定 | 第25-26页 |
| 3.8 B7-H4分子对其相互作用蛋白DNA-PKcs活性的影响 | 第26页 |
| 4 讨论 | 第26-29页 |
| 第二部分 寻找B7-H4野生型及核定位序列突变型在 786O中的差异表达蛋白及其功能研究 | 第29-38页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| 1.1 主要试剂 | 第29-30页 |
| 1.2 主要仪器 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-31页 |
| 2.1 细胞培养 | 第30页 |
| 2.2 Trizol法提取总RNA | 第30-31页 |
| 2.3 MTT细胞增殖实验 | 第31页 |
| 2.4 统计学分析 | 第31页 |
| 3 实验结果 | 第31-36页 |
| 3.1 基因芯片结果 | 第31-33页 |
| 3.2 蛋白水平检测差异基因表达 | 第33-35页 |
| 3.3 MTT细胞增殖实验检测细胞增殖率 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 论文总结 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 综述 | 第42-55页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
