| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写对照表(Abbreviations) | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 1、实验材料与方法 | 第14-39页 |
| 1.1 Cav1.2相关基因载体构建 | 第14-22页 |
| 1.1.1 大鼠心肌细胞基因组DNA的提取 | 第14-15页 |
| 1.1.2 引物设计 | 第15-16页 |
| 1.1.3 PCR | 第16-17页 |
| 1.1.5 PCR产物sub-clon | 第17-18页 |
| 1.1.6 Inoue法超级感受态的制备 | 第18-19页 |
| 1.1.7 转化步骤 | 第19-20页 |
| 1.1.8 质粒中量提取 | 第20-22页 |
| 1.2 细胞（H9C2、293T、原代心肌）培养、转染及慢病毒包装 | 第22-26页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第22-24页 |
| 1.2.2 大鼠心肌细胞原代培养 | 第24-25页 |
| 1.2.3 细胞转染 | 第25页 |
| 1.2.4 慢病毒包装及细胞感染 | 第25-26页 |
| 1.3 电生理膜片钳技术全细胞记录钙电流 | 第26页 |
| 1.4 荧光素酶活性检测 | 第26-28页 |
| 1.5 细胞免疫荧光技术 | 第28-29页 |
| 1.5.1 Cy3免疫荧光标记Cav1.2蛋白 | 第28-29页 |
| 1.5.2 DAPI染液免疫荧光染细胞核 | 第29页 |
| 1.6 PCR法检测Myocadin，Cav1.2在转录水平的表达 | 第29-32页 |
| 1.7 Western bloting检测Myocadin和Cav1.2蛋白的表达 | 第32-36页 |
| 1.8 CH-IP染色质免疫共沉淀 | 第36-38页 |
| 1.8.1 优化超声破碎条件 | 第36-37页 |
| 1.8.2 用优化好的条件进行染色质免疫共沉淀 | 第37-38页 |
| 1.9 统计学处理 | 第38-39页 |
| 2、结果 | 第39-46页 |
| 2.1 Myocardin对心肌细胞膜钙电流的影响 | 第39-40页 |
| 2.2 Myocardin可以激活Cav1.2基因的表达 | 第40-41页 |
| 2.2.1 Myocardin可激活Cav1.2基因mRNA的表达 | 第40-41页 |
| 2.2.2 Myocardin可激活Cav1.2基因蛋白的表达 | 第41页 |
| 2.3 Myocardin影响Cav1.2蛋白分布 | 第41-42页 |
| 2.4 Myocardin激活LTCC Cav1.2基因的转录 | 第42-43页 |
| 2.5 Myocardin激活Cav1.2基因的转录依赖其启动子上的CarGbox | 第43-46页 |
| 2.5.1 CarGbox突变之后报告基因活性显著降低 | 第43-46页 |
| 2.5.2 CHIP染色质免疫共沉淀法检测Myocardin与Cav1.2启动子区CarGbox特异性结合 | 第46页 |
| 3、讨论 | 第46-48页 |
| 4、结论与展望 | 第48-50页 |
| 4.1 结论 | 第48-49页 |
| 4.2 展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 文献综述 钙离子通道病的研究进展 | 第54-61页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61-62页 |
| 附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第62页 |
