重组人胶原绑定骨形态发生蛋白2在大肠杆菌中的表达、纯化与复性
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 BMPs的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.1.1 BMPs的发现 | 第13页 |
| 1.1.2 BMP2的性质 | 第13-14页 |
| 1.1.3 BMP2的信号通路 | 第14页 |
| 1.1.4 BMPs的生物学活性 | 第14-17页 |
| 1.2 BMPs的制备 | 第17-18页 |
| 1.2.1 早期BMPs的制备 | 第17页 |
| 1.2.2 重组BMPs的制备 | 第17-18页 |
| 1.3 BMPs的复性 | 第18-21页 |
| 1.3.1 包涵体的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.2 包涵体复性研究 | 第19页 |
| 1.3.3 常用复性方法 | 第19-21页 |
| 1.4 胶原绑定结构域的研究进展 | 第21-23页 |
| 第二章 BMP2的构建、表达与复性 | 第23-40页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第23-26页 |
| 2.1.1 试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.2 仪器 | 第24页 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 | 第24-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.2.1 表达载体的构建 | 第26页 |
| 2.2.2 BMP2载体转化入大肠杆菌 | 第26-27页 |
| 2.2.3 BMP2载体的表达 | 第27-28页 |
| 2.2.4 BMP2的纯化 | 第28-29页 |
| 2.2.5 BMP2的复性 | 第29页 |
| 2.2.6 蛋白定量、过滤除菌 | 第29-30页 |
| 2.3 结果 | 第30-36页 |
| 2.3.1 表达载体的检测 | 第30-31页 |
| 2.3.2 BMP2的表达 | 第31-32页 |
| 2.3.3 BMP2的纯化 | 第32-35页 |
| 2.3.4 BMP2的复性 | 第35-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-40页 |
| 第三章 CBD-BMP2的构建、表达与复性 | 第40-49页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第40-43页 |
| 3.1.1 试剂 | 第40-41页 |
| 3.1.2 仪器 | 第41页 |
| 3.1.3 主要溶液的配制 | 第41-43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.2.1 表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.2.3 CBD-BMP2载体的表达 | 第44页 |
| 3.2.4 CBD-BMP2的纯化 | 第44页 |
| 3.2.5 CBD-BMP2的复性 | 第44-45页 |
| 3.2.6 蛋白定量、过滤除菌 | 第45页 |
| 3.3 结果 | 第45-47页 |
| 3.3.1 CBD-BMP2的表达 | 第45-46页 |
| 3.3.2 CBD-BMP2的纯化 | 第46-47页 |
| 3.3.3 CBD-BMP2的复性 | 第47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 CBD-BMP2的生物活性检测 | 第49-58页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第49-50页 |
| 4.1.1 试剂 | 第49页 |
| 4.1.2 仪器 | 第49页 |
| 4.1.3 主要溶液的配制 | 第49-50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-52页 |
| 4.2.1 胶原提取 | 第50页 |
| 4.2.2 胶原支架的制备 | 第50页 |
| 4.2.3 MC-3T3-E1细胞培养 | 第50-51页 |
| 4.2.4 CBD-BMP2的成骨诱导活性检测 | 第51页 |
| 4.2.5 CBD-BMP2的胶原绑定能力检测 | 第51-52页 |
| 4.3 结果 | 第52-55页 |
| 4.3.1 胶原支架的制备 | 第52-53页 |
| 4.3.2 CBD-BMP2的成骨诱导活性检测 | 第53页 |
| 4.3.3 CBD-BMP2的胶原绑定能力检测 | 第53-55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 作者简介及攻读硕士期间所取得的科研成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
