| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 前言 | 第13-24页 |
| 1.1 HBV概述 | 第13-18页 |
| 1.1.1 HBV基因组和病毒颗粒结构 | 第13-15页 |
| 1.1.2 HBV复制过程 | 第15-16页 |
| 1.1.3 HBV感染动物模型 | 第16-18页 |
| 1.1.4 HBV感染引发的肝损伤形成机制 | 第18页 |
| 1.1.5 慢性乙型肝炎治疗进展 | 第18页 |
| 1.2 短发夹RNA概述 | 第18-20页 |
| 1.2.1 shRNA用于治疗乙型肝炎研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2.2 shRNA作用机制 | 第19-20页 |
| 1.3 MSCs概述 | 第20-22页 |
| 1.3.1 肝细胞样细胞的鉴定方法 | 第21页 |
| 1.3.2 MSCs治疗肝损伤的机制 | 第21-22页 |
| 1.4 本文的立题依据 | 第22-24页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第24-35页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.1 工具酶 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株和细胞 | 第24页 |
| 2.1.3 试剂盒 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.5 试剂配制方法 | 第25页 |
| 2.2 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.3.1 细胞培养及转染 | 第26页 |
| 2.3.2 稳定表达细胞系构建及单克隆筛选 | 第26-28页 |
| 2.3.3 Western blot | 第28-29页 |
| 2.3.4 miMSC向成骨细胞分化 | 第29页 |
| 2.3.5 茜素红染色 | 第29页 |
| 2.3.6 miMSCs向肝细胞分化 | 第29-30页 |
| 2.3.7 RT-PCR | 第30-32页 |
| 2.3.8 糖原染色 | 第32页 |
| 2.3.9 尿素含量检测 | 第32页 |
| 2.3.10 miMSC移植治疗模拟乙型肝炎肝损伤鼠模型 | 第32页 |
| 2.3.11 小鼠脾内移植miMSC | 第32-33页 |
| 2.3.12 血清处理方法 | 第33页 |
| 2.3.13 ELISA法 | 第33页 |
| 2.3.14 AST、ALT含量的测定 | 第33页 |
| 2.3.15 冷冻切片 | 第33-34页 |
| 2.3.16 天狼星红染色 | 第34-35页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第35-53页 |
| 3.1 miMSC-sh RNA的构建及鉴定 | 第35-40页 |
| 3.1.1 慢病毒系统构建miMSC-shRNA | 第35-36页 |
| 3.1.2 Hygro1571694质粒构建及沉默效率检测 | 第36-38页 |
| 3.1.3 Hygro质粒系统构建miMSC-shRNA及沉默效率检测 | 第38-40页 |
| 3.2 miMSC-sh RNA的体外分化及检测 | 第40-47页 |
| 3.2.1 向成骨细胞分化 | 第41-42页 |
| 3.2.2 向肝细胞分化 | 第42-46页 |
| 3.2.3 miMSC-shRNA向肝细胞分化后抑制HBV复制检测 | 第46-47页 |
| 3.3 miMSC-sh RNA治疗乙型肝炎肝损伤小鼠模型 | 第47-53页 |
| 3.3.1 miMSC-shRNA2移植抑制HBsAg和HBeAg的表达 | 第48页 |
| 3.3.2 miMSC-shRNA2移植降解小鼠肝脏内S基因的mRNA | 第48-49页 |
| 3.3.3 肝重/体重 | 第49-50页 |
| 3.3.4 ALT、AST检测 | 第50-51页 |
| 3.3.5 天狼星红染色 | 第51-53页 |
| 第4章 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
