摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
符号说明 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 产气荚膜梭菌病的研究进展 | 第10-14页 |
1.1.1 产气荚膜梭菌的生物学特性 | 第10-11页 |
1.1.2 产气荚膜梭菌的致病性 | 第11页 |
1.1.3 产气荚膜梭菌病的流行情况及危害 | 第11-13页 |
1.1.4 发病机理 | 第13页 |
1.1.5 临床症状 | 第13-14页 |
1.1.6 病理变化 | 第14页 |
1.1.7 诊断 | 第14页 |
1.2 产气荚膜梭菌疫苗的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 产气荚膜梭菌毒素蛋白的研究进展 | 第15-17页 |
1.3.1 α毒素 | 第15-16页 |
1.3.2 β毒素 | 第16-17页 |
1.3.3 ε毒素 | 第17页 |
1.3.4 ι毒素 | 第17页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第17-20页 |
2 牛产气荚膜梭菌分离株PCR分型鉴定和致病性研究 | 第20-38页 |
2.1 材料 | 第20-22页 |
2.1.1 菌株及实验动物 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第20-21页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-24页 |
2.2.1 菌种增殖培养 | 第22页 |
2.2.2 革兰氏染色镜检 | 第22页 |
2.2.3 细菌DNA模板制备 | 第22页 |
2.2.4 产气荚膜梭菌外毒素的PCR检测 | 第22-23页 |
2.2.5 产气荚膜梭菌PCR产物测序 | 第23-24页 |
2.2.6 筛选产毒培养基 | 第24页 |
2.2.7 产气荚膜梭菌A型菌株致病性的测定 | 第24页 |
2.3 结果 | 第24-35页 |
2.3.1 菌种复苏及染色镜检 | 第24-25页 |
2.3.2 PCR检测结果 | 第25-28页 |
2.3.3 测序结果 | 第28-34页 |
2.3.4 筛选产毒素培养基结果 | 第34页 |
2.3.5 A型菌株致病性的测定 | 第34-35页 |
2.4 讨论 | 第35-38页 |
3 牛产气荚膜梭菌三价类毒素疫苗制备与免疫效果评价 | 第38-54页 |
3.1 材料 | 第38页 |
3.1.1 菌株和实验动物 | 第38页 |
3.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第38页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第38页 |
3.2 方法 | 第38-43页 |
3.2.1 菌种复苏 | 第38页 |
3.2.2 外毒素的制备 | 第38-39页 |
3.2.3 外毒素的半数致死量(LD50)测定 | 第39页 |
3.2.4 产气荚膜梭菌外毒素的粗提 | 第39-40页 |
3.2.5 SDS-PAGE检测产气荚膜梭菌毒素蛋白 | 第40页 |
3.2.6 毒素灭活及疫苗制备 | 第40页 |
3.2.7 类毒素疫苗的质量检验 | 第40-41页 |
3.2.8 动物免疫试验 | 第41页 |
3.2.9 间接ELISA检测方法的优化 | 第41-43页 |
3.3 结果与分析 | 第43-51页 |
3.3.1 外毒素小鼠半数致死量(LD50)测定结果 | 第43-44页 |
3.3.2 粗提外毒素SDS-PAGE检测结果 | 第44-45页 |
3.3.3 毒素灭活时间测定 | 第45页 |
3.3.4 类毒素苗检验结果 | 第45-46页 |
3.3.5 三价类毒素疫苗的免疫效力试验 | 第46-47页 |
3.3.6 分子筛凝胶层析结果 | 第47-48页 |
3.3.7 间接ELISA方法反应条件的优化结果 | 第48-50页 |
3.3.8 特异性试验结果 | 第50页 |
3.3.9 敏感性试验结果 | 第50-51页 |
3.3.10 重复性试验结果 | 第51页 |
3.3.11 免疫小鼠血清抗体效价的消长规律 | 第51页 |
3.4 讨论 | 第51-54页 |
4 结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
致谢 | 第64-66页 |
附录 | 第66-68页 |
个人简历 | 第68页 |