| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-20页 |
| 1.1 皮氏蛾螺简介 | 第13页 |
| 1.2 血管紧张素转化酶的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 血管紧张素转化酶 | 第13页 |
| 1.2.2 ACE对人体血压的调节 | 第13-15页 |
| 1.2.3 ACE的分离纯化 | 第15页 |
| 1.3 固定化酶的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 固定化ACE的研究进展 | 第16页 |
| 1.3.2 琼脂糖微球 | 第16页 |
| 1.3.3 分子筛SBA-15研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 ACE抑制肽的制备及研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5 课题研究意义及内容 | 第18-20页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第18-19页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 Zn-SBA-15固定化ACE的制备及活性研究 | 第20-33页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.2.1 实验原料 | 第20页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.3.1 SBA-15的制备 | 第22页 |
| 2.3.1.1 SBA-15的制备方法 | 第22页 |
| 2.3.1.2 SBA-15的表征方法 | 第22页 |
| 2.3.1.3 Zn-SBA-15的制备方法 | 第22页 |
| 2.3.2 猪肺血管紧张素转化酶的粗提 | 第22-23页 |
| 2.3.3 Zn-SBA-15固定化ACE的制备 | 第23页 |
| 2.3.4 Zn-SBA-15固定化ACE的稳定性研究 | 第23页 |
| 2.3.5 ACE活性测定 | 第23-24页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第24-31页 |
| 2.4.1 SBA-15的表征 | 第24-26页 |
| 2.4.1.1 XRD | 第24-25页 |
| 2.4.1.2 N_2吸附 | 第25-26页 |
| 2.4.2 Zn-SBA-15固定化ACE的条件优化 | 第26-29页 |
| 2.4.2.1 固定化时间对ACE固定化的影响 | 第26-27页 |
| 2.4.2.2 固定化温度对ACE固定化的影响 | 第27页 |
| 2.4.2.3 固定化酶溶液的pH值对ACE固定化的影响 | 第27-28页 |
| 2.4.2.4 ACE酶液蛋白浓度对ACE固定化的影响 | 第28-29页 |
| 2.4.3 Zn-SBA-15固定化ACE性质 | 第29-31页 |
| 2.4.3.1 温度对ACE活力的影响 | 第29-30页 |
| 2.4.3.2 pH对ACE活力的影响 | 第30-31页 |
| 2.5 本章小结 | 第31-33页 |
| 第三章 琼脂糖固定化ACE的制备及活性研究 | 第33-45页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料 | 第33-35页 |
| 3.2.1 实验原料 | 第33-34页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第34页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第34-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-36页 |
| 3.3.1 交联4B琼脂糖凝胶微球的活化 | 第35页 |
| 3.3.2 琼脂糖微球表面的环氧基密度测定方法 | 第35-36页 |
| 3.3.3 交联CL 4B琼脂糖微球固定化ACE的制备 | 第36页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第36-44页 |
| 3.4.1 反应条件对琼脂糖微球表面环氧基密度的影响 | 第36-41页 |
| 3.4.1.1 NaOH溶液浓度对琼脂微球表面环氧基密度的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.1.2 NaBH_4质量对琼脂微球表面环氧基密度的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.1.3 环氧氯丙烷体积分数对琼脂微球表面环氧基密度的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.1.4 反应温度对琼脂微球表面环氧基密度的影响 | 第39-40页 |
| 3.4.1.5 反应时间对琼脂微球表面环氧基密度的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.2 固定化条件对固定化ACE活力的影响 | 第41-44页 |
| 3.4.2.1 反应温度对固定化ACE活力的影响 | 第41-42页 |
| 3.4.2.2 反应时间对固定化ACE活力的影响 | 第42页 |
| 3.4.2.3 酶浓度对固定化ACE活力的影响 | 第42-43页 |
| 3.4.2.4 pH对固定化ACE活力的影响 | 第43-44页 |
| 3.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 Zn-SBA-15固定化ACE亲和分离ACE抑制肽及分离肽的活性研究 | 第45-63页 |
| 4.1 引言 | 第45页 |
| 4.2 实验材料 | 第45-46页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第45-46页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第46页 |
| 4.3 实验方法 | 第46-49页 |
| 4.3.1 Zn-SBA-15固定化ACE亲和分离ACE抑制肽 | 第46-47页 |
| 4.3.2 皮氏蛾螺酶解液及亲和分离组分子量分布测定 | 第47-48页 |
| 4.3.3 RP-HPLC纯化ACE抑制肽 | 第48页 |
| 4.3.4 Q-TOF/TOF质谱分析 | 第48页 |
| 4.3.4.1 活性肽序列鉴定 | 第48页 |
| 4.3.4.2 肽的合成及纯度鉴定 | 第48页 |
| 4.3.5 肽的ACE抑制类型测定 | 第48-49页 |
| 4.3.6 MTT法检测细胞毒性 | 第49页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第49-61页 |
| 4.4.1 Zn-SBA-15固定化ACE吸附肽条件优化 | 第49-52页 |
| 4.4.1.1 pH的影响 | 第49-50页 |
| 4.4.1.2 NaCl浓度的影响 | 第50-51页 |
| 4.4.1.3 吸附时间的影响 | 第51-52页 |
| 4.4.1.4 酶解液蛋白浓度的影响 | 第52页 |
| 4.4.2 皮氏蛾螺酶解液及亲和分离组分分子量分布及ACE抑制活性比较 | 第52-53页 |
| 4.4.3 RP-HPLC法分离纯化活性肽 | 第53-54页 |
| 4.4.4 A_1和A_3的质谱图解析及氨基酸序列的鉴定 | 第54-55页 |
| 4.4.5 A_1和A_3的人工合成及纯度鉴定 | 第55-57页 |
| 4.4.6 A_1和A_3的抑制活性分析 | 第57-58页 |
| 4.4.7 A_1和A_3的抑制类型分析 | 第58-59页 |
| 4.4.8 A_1和A_3对细胞活力的影响 | 第59-61页 |
| 4.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第五章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 附录 | 第72页 |
