| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第7-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-20页 |
| 1 贝类免疫系统的概述 | 第10-12页 |
| 1.1 贝类的免疫系统 | 第10页 |
| 1.2 贝类的细胞免疫 | 第10-11页 |
| 1.3 贝类的体液免疫 | 第11-12页 |
| 2 丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究 | 第12-18页 |
| 2.1 丝氨酸蛋白酶抑制剂的结构特点和作用机制 | 第13-14页 |
| 2.2 丝氨酸蛋白酶抑制剂的分类 | 第14-18页 |
| 2.2.1 Kazal型抑制剂 | 第14-15页 |
| 2.2.2 Kunitz型抑制剂 | 第15-17页 |
| 2.2.3 α-巨球蛋白 | 第17页 |
| 2.2.4 Serpin型抑制剂 | 第17-18页 |
| 3 本研究目的和意义 | 第18-20页 |
| 第2章 褶纹冠蚌丝氨酸蛋白酶抑制剂kunitz型基因和Serpin B型基因的克隆及表达 | 第20-78页 |
| 1 前言 | 第20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.2 主要仪器和试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第21页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.3 质粒和菌株 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-39页 |
| 2.3.1 褶纹冠蚌总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.3.2 褶纹冠蚌SMART c DNA的合成 | 第23-25页 |
| 2.3.3 Kunitz型基因和Serpin B型基因的中间片段的获得 | 第25-27页 |
| 2.3.4 Kunitz型和Serpin B型基因 3’末端和 5’末端的克隆 | 第27-28页 |
| 2.3.5 Kunitz型和Serpin B型基因的序列分析 | 第28-30页 |
| 2.3.6 RT-PCR检测褶纹冠蚌Kunitz型基因和Serpin B型基因在褶纹冠蚌不同组织中的表达 | 第30-32页 |
| 2.3.7 Kunitz和Serpin B型基因的诱导表达 | 第32页 |
| 2.3.8 Kunitz型基因的原核表达 | 第32-39页 |
| 3 实验结果 | 第39-73页 |
| 3.1 褶纹冠蚌中总RNA的提取 | 第39页 |
| 3.2 褶纹冠蚌Kunitz和Serpin B基因c DNA全长克隆 | 第39-41页 |
| 3.3 褶纹冠蚌Kunitz和Serpin B型基因c DNA全长序列及推导的氨基酸序列 | 第41-45页 |
| 3.4 Kunitz型和Serpin B型丝氨酸蛋白酶抑制剂氨基酸序列的同源性比较 | 第45-50页 |
| 3.5 Kunitz型和Serpin B型丝氨酸蛋白酶抑制剂的系统进化树 | 第50-53页 |
| 3.6 Kunitz和Serpin B型基因序列的生物信息学分析 | 第53-61页 |
| 3.7 Kunitz型基因和Serpin型基因的组织表达 | 第61-68页 |
| 3.8 Kunitz和Serpin B型基因的诱导表达 | 第68-71页 |
| 3.9 Kunitz基因的原核表达及纯化 | 第71-72页 |
| 3.10 重组Kunitz蛋白浓度的测定 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-78页 |
| 第3章 结论与展望 | 第78-80页 |
| 1 结论 | 第78-79页 |
| 2 展望 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
