| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 引言 | 第9-13页 |
| 1.1 白细胞介素8（IL-8）的性质和生物学功能 | 第9-11页 |
| 1.2 鱼类中IL-8的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.3 研究的内容和意义 | 第12-13页 |
| 第二章 草鱼重组IL-8蛋白（rgc IL-8）的原核表达与纯化 | 第13-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-16页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第13页 |
| 2.1.2 菌种和质粒 | 第13-14页 |
| 2.1.3 主要实验仪器和设备 | 第14页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.5 主要溶液配制 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法与操作 | 第16-24页 |
| 2.2.1草鱼IL-8重组蛋白原核表达质粒的构建 | 第16-19页 |
| 2.2.2 草鱼IL-8(rgcIL-8)在原核中的诱导表达 | 第19-21页 |
| 2.2.3 蛋白保存条件优化 | 第21页 |
| 2.2.4 rgcIL-8活性验证 | 第21-24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-30页 |
| 2.3.1 pET30(a)-IL8C表达质粒的构建、鉴定和蛋白原核诱导表达 | 第24-25页 |
| 2.3.2 pET30(a)-IL8N表达质粒的构建、鉴定和蛋白原核诱导表达 | 第25-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 草鱼白细胞介素8对炎症相关基因的表达和调控 | 第32-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.2 实验方法与操作 | 第32页 |
| 3.2.1 草鱼头肾白细胞的分离 | 第32页 |
| 3.2.2 rgcIL-8处理草鱼头肾白细胞 | 第32页 |
| 3.2.3 信号通路抑制剂和rgcIL-8共同处理草鱼头肾白细胞 | 第32页 |
| 3.2.4 实时定量PCR | 第32页 |
| 3.2.5 数据转换和统计 | 第32页 |
| 3.3 实验结果 | 第32-36页 |
| 3.3.1 重组草鱼IL-8蛋白对自身的诱导表达及其信号通路 | 第32-34页 |
| 3.3.2 rgcIL-8以时间依赖和浓度依赖方式诱导IL-1β与TNF-α的表达 | 第34-35页 |
| 3.3.3 rgcIL-8通过MAPK和NFκβ信号通路诱导炎症基因的表达 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 草鱼IL-8与IL-1β蛋白相互作用的探讨 | 第38-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第38页 |
| 4.2 实验方法与操作 | 第38页 |
| 4.2.1 草鱼头肾白细胞的分离 | 第38页 |
| 4.2.2 重组草鱼IL-1β蛋白与IL-8中和抗体共处理草鱼中肾白细胞 | 第38页 |
| 4.2.3 重组草鱼IL-8蛋白与IL-1β中和抗体共处理草鱼中肾白细胞 | 第38页 |
| 4.2.4 实时荧光定量PCR | 第38页 |
| 4.3 实验结果 | 第38-41页 |
| 4.3.1 草鱼IL-8部分参与IL-1β对其自身的调控 | 第38-39页 |
| 4.3.2 草鱼IL-1β不参与IL-8对IL-8和IL-1β的调控 | 第39-41页 |
| 4.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第五章 草鱼白细胞介素8诱导一氧化氮的产生 | 第42-46页 |
| 5.1 实验材料 | 第42页 |
| 5.2 实验方法与操作 | 第42-43页 |
| 5.2.1 草鱼头肾白细胞的分离 | 第42页 |
| 5.2.2 重组草鱼IL-8蛋白处理草鱼中肾白细胞 | 第42页 |
| 5.2.3 实时荧光定量PCR | 第42页 |
| 5.2.4 Griess方法检测一氧化氮的含量 | 第42-43页 |
| 5.3 实验结果 | 第43-44页 |
| 5.3.1 rgcIL-8诱导NO的产生 | 第43-44页 |
| 5.3.2 rgc IL-8诱导iNOS基因的表达 | 第44页 |
| 5.4 讨论 | 第44-46页 |
| 第六章 总结 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 | 第53-54页 |
