摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-35页 |
1 GABA概述 | 第13-26页 |
1.1 GABA理化性质 | 第13-14页 |
1.2 GABA代谢 | 第14-19页 |
1.2.1 GABA代谢途径 | 第14-16页 |
1.2.2 GABA代谢中重要的酶 | 第16-19页 |
1.3 生理功能 | 第19-23页 |
1.3.1 GABA在哺乳动物及人体中的生理功能 | 第19-20页 |
1.3.2 GABA在植物中的生理功能 | 第20-23页 |
1.4 GABA的检测与生产富集 | 第23-26页 |
1.4.1 GABA检测方法 | 第23-24页 |
1.4.2 GABA的生产与富集 | 第24-26页 |
2 转基因水稻的研究 | 第26-32页 |
2.1 水稻转基因技术 | 第26-29页 |
2.1.1 农杆菌介导转化法 | 第27-28页 |
2.1.2 基因枪法 | 第28页 |
2.1.3 花粉管通道法 | 第28-29页 |
2.2 转基因技术在水稻育种中应用 | 第29-32页 |
2.2.1 抗除草剂育种 | 第29页 |
2.2.2 抗病水稻 | 第29-30页 |
2.2.3 抗虫水稻 | 第30-31页 |
2.2.4 改良稻米品质 | 第31页 |
2.2.5 抗逆水稻 | 第31-32页 |
2.2.6 其他转基因水稻 | 第32页 |
3 本研究的目的与意义 | 第32-35页 |
第二章 实验材料与方法 | 第35-45页 |
1 实验材料 | 第35页 |
2 实验方法 | 第35-45页 |
2.1 载体构建 | 第35-39页 |
2.1.1 目的片段的扩增 | 第35-37页 |
2.1.2 目的片段的纯化 | 第37页 |
2.1.3 TA克隆 | 第37页 |
2.1.4 转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第37页 |
2.1.5 目的片段的菌液PCR检测 | 第37-38页 |
2.1.6 质粒的提取 | 第38页 |
2.1.7 载体的构建 | 第38-39页 |
2.1.8 转化农杆菌EHA105感受态细胞 | 第39页 |
2.2 组织培养 | 第39-40页 |
2.2.1 诱导愈伤 | 第39页 |
2.2.2 继代 | 第39页 |
2.2.3 共培养 | 第39-40页 |
2.2.4 除菌 | 第40页 |
2.2.5 筛选抗性愈伤 | 第40页 |
2.2.6 分化出苗 | 第40页 |
2.3 潮霉素鉴定 | 第40-41页 |
2.4 PCR检测 | 第41-42页 |
2.5 实时荧光定量PCR分析 | 第42页 |
2.6 GABA和氨基酸检测 | 第42-43页 |
2.7 Western blotting | 第43页 |
2.8 农艺性状 | 第43-45页 |
第三章 结果与分析 | 第45-61页 |
1 OsGAD1~(OE)和OsGAD2~(OE)的相关结果与分析 | 第45-50页 |
1.1 过表达载体的构建 | 第45-46页 |
1.2 组织培养获得T_0代植株 | 第46-47页 |
1.3 转基因阳性植株检测 | 第47-49页 |
1.4 转基因植株中OsGAD表达分析及GABA含量的测定 | 第49-50页 |
2 OsGABA-T1~(RNAi)和OsGABA-T2~(RNAi)的相关结果与分析 | 第50-57页 |
2.1 宁粳1号花后不同时期种子中OsGABA-T基因表达分析 | 第50-51页 |
2.2 干扰载体的构建 | 第51-52页 |
2.3 转基因阳性植株的检测 | 第52-53页 |
2.4 转基因株系OsGABA-T基因表达分析 | 第53-55页 |
2.5 OsGABA-T1~(RNAi)转基因种子GABA含量测定 | 第55页 |
2.6 OsGABA-T1~(RNAi)转基因种子氨基酸测定 | 第55-56页 |
2.7 Western blotting | 第56-57页 |
2.8 农艺性状 | 第57页 |
3 OsGABA-T1~(RNAi-M)和OsGABA-T2~(RNAi-M)的相关结果与分析 | 第57-61页 |
3.1 T_1代转基因株系叶片OsGABA-T基因表达分析 | 第57-59页 |
3.2 T_2代转基因种子GABA含量测定 | 第59-61页 |
第四章 讨论与总结 | 第61-65页 |
1 讨论 | 第61-62页 |
2 创新之处和后续工作及展望 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-79页 |
附录 | 第79-85页 |
致谢 | 第85页 |