| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 材料与方法 | 第17-31页 |
| 1、材料 | 第17-19页 |
| 2、实验方法 | 第19-30页 |
| 2.1 细胞培养 | 第19-20页 |
| 2.2 Trizol法提取总RNA | 第20页 |
| 2.3 反转录 | 第20-21页 |
| 2.4 qPCR | 第21页 |
| 2.4.1 反应体系及引物序列： | 第21页 |
| 2.4.2 qPCR反应条件： | 第21页 |
| 2.5 EA.hy926细胞系上，抗生素G418筛选转染的阳性细胞的浓度 | 第21-29页 |
| 2.5.1 构建稳定高表达Tim-3的Ea.hy926细胞系 | 第22-27页 |
| 2.5.2 瞬时转染细胞系 | 第27-29页 |
| 2.6 流式细胞术 | 第29-30页 |
| 2.6.1 LPS刺激细胞 | 第29页 |
| 2.6.2 Griess法检测细胞培养上清中NO~(2-) | 第29-30页 |
| 2.6.3 Western Blot | 第30页 |
| 3、 统计学分析 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-37页 |
| 1．G418筛选阳性血管内皮细胞系EA.hy926的浓度 | 第31页 |
| 2．构建稳定高表达Tim-3EA.hy926细胞系 | 第31-32页 |
| 3．构建稳定低表达Tim-3EA.hy926细胞系 | 第32-34页 |
| 4．阻断TIM-3信号通路，EA.HY926细胞系表达iNOS mRNA水平降低，释放NO水平也降低 | 第34页 |
| 5．稳定高表达TIM-3的EA.HY926细胞系表达iNOS mRNA水平升高，释放NO水平也升高 | 第34-35页 |
| 6．稳定低表达TIM-3的细胞表达iNOS mRNA水平降低，释放NO水平也降低 | 第35-37页 |
| 讨论 | 第37-45页 |
| 结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 综述 | 第51-63页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
