| 摘要 | 第13-14页 |
| Abstract | 第14页 |
| 第一章 引言 | 第15-24页 |
| 1.1 人参皂苷的生物转化研究 | 第15-18页 |
| 1.1.1 酶解法 | 第15-16页 |
| 1.1.2 微生物转化法 | 第16-18页 |
| 1.2 β-葡萄糖苷酶的研究概况 | 第18-20页 |
| 1.2.1 β-葡萄糖苷酶的分类 | 第18页 |
| 1.2.2 β-葡萄糖苷酶的提取、纯化及酶活测定方法 | 第18-19页 |
| 1.2.3 β-葡萄糖苷酶的酶学性质 | 第19-20页 |
| 1.3 人参皂苷Rg_1的主要药理作用 | 第20-22页 |
| 1.3.1 GRg_1对中枢神经系统的作用 | 第21页 |
| 1.3.2 GRg_1对心血管系统的作用 | 第21页 |
| 1.3.3 GRg_1对内分泌系统的作用 | 第21页 |
| 1.3.4 GRg_1对免疫系统的作用 | 第21-22页 |
| 1.4 人参皂苷F_1的研究进展 | 第22-24页 |
| 第二章 生物转化底物与产物分离分析方法的建立 | 第24-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 试剂 | 第24页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 底物与产物HPLC检测方法的建立 | 第24-25页 |
| 2.2.2 GRg_1的分离纯化 | 第25页 |
| 2.2.3 转化产物的分离纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.4 底物与产物的结构鉴定方法 | 第26页 |
| 2.2.5 底物与产物的含量标准曲线的绘制 | 第26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-29页 |
| 2.3.1 GRg_1的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.2 转化产物的鉴定 | 第27页 |
| 2.3.3 底物与产物HPLC检测方法的建立 | 第27-29页 |
| 2.4 小结 | 第29页 |
| 2.5 讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 菌株2246的鉴定 | 第30-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 菌株 | 第30页 |
| 3.1.2 引物 | 第30页 |
| 3.1.3 酶与试剂 | 第30页 |
| 3.1.4 培养基 | 第30-31页 |
| 3.1.5 实验仪器 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-34页 |
| 3.2.1 点种培养法 | 第31-32页 |
| 3.2.2 插片培养法 | 第32页 |
| 3.2.3 琼脂槽法 | 第32页 |
| 3.2.4 制备霉菌浸片 | 第32页 |
| 3.2.5 菌株2246基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.2.6 ITS-5.8S片段的PCR扩增 | 第33-34页 |
| 3.2.7 PCR产物的纯化 | 第34页 |
| 3.2.8 ITS-5.8S片段的测序 | 第34页 |
| 3.2.9 菌株2246的系统进化树分析 | 第34页 |
| 3.3 实验结果 | 第34-38页 |
| 3.3.1 菌落形态 | 第34-35页 |
| 3.3.2 产孢结构形态 | 第35-36页 |
| 3.3.3 PCR扩增产物 | 第36页 |
| 3.3.4 ITS-5.8S序列的进化分析 | 第36-38页 |
| 3.4 小结 | 第38页 |
| 3.5 讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 β-D-葡萄糖苷酶的分离纯化及性质研究 | 第39-59页 |
| 4.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 4.1.1 菌种 | 第39页 |
| 4.1.2 试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 填料 | 第39页 |
| 4.1.4 培养基 | 第39-40页 |
| 4.1.5 仪器 | 第40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-49页 |
| 4.2.1 菌体产酶方式的初步考察 | 第40-41页 |
| 4.2.2 粗酶的制备 | 第41页 |
| 4.2.3 β-D-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第41-42页 |
| 4.2.4 β-D-葡萄糖苷酶分子量的测定 | 第42-43页 |
| 4.2.5 β-D-葡萄糖苷酶的电泳 | 第43-45页 |
| 4.2.6 β-D-葡萄糖苷酶活性检测 | 第45-47页 |
| 4.2.7 β-D-葡萄糖苷酶蛋白含量的测定 | 第47页 |
| 4.2.8 β-D-葡萄糖苷酶等电点的测定 | 第47-48页 |
| 4.2.9 pH及温度对β-D-葡萄糖苷酶活性的影响 | 第48页 |
| 4.2.10 糖蛋白染色 | 第48-49页 |
| 4.2.11 金属离子对β-D-葡萄糖苷酶活性的影响 | 第49页 |
| 4.2.12 β-D-葡萄糖苷酶动力学参数的测定 | 第49页 |
| 4.2.13 β-D-葡萄糖苷酶底物水解特异性 | 第49页 |
| 4.3 实验结果 | 第49-57页 |
| 4.3.1 菌体产酶方式的研究 | 第49-50页 |
| 4.3.2 β-D-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第50-52页 |
| 4.3.3 β-D-葡萄糖苷酶分子量的测定 | 第52-53页 |
| 4.3.4 β-D-葡萄糖苷酶的纯度测定 | 第53页 |
| 4.3.5 β-D-葡萄糖苷酶活性检测 | 第53-54页 |
| 4.3.6 β-D-葡萄糖苷酶蛋白含量的测定 | 第54页 |
| 4.3.7 β-D-葡萄糖苷酶等电点的测定 | 第54-55页 |
| 4.3.8 β-D-葡萄糖苷酶的最适温度及pH | 第55页 |
| 4.3.9 糖蛋白染色 | 第55页 |
| 4.3.10 金属离子对β-D-葡萄糖苷酶活性的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.11 β-D-葡萄糖苷酶动力学参数的测定 | 第56页 |
| 4.3.12 β-D-葡萄糖苷酶的底物特异性研究 | 第56-57页 |
| 4. 小结 | 第57-58页 |
| 5. 讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 菌种的初步转化工艺研究 | 第59-73页 |
| 5.1 实验材料 | 第59页 |
| 5.1.1 试剂 | 第59页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第59页 |
| 5.1.3 培养基 | 第59页 |
| 5.2 实验方法 | 第59-63页 |
| 5.2.1 单因子实验考察培养基组成 | 第59-60页 |
| 5.2.2 培养基碳源/氮源(C/N)组成及配比的选择 | 第60-61页 |
| 5.2.3 种子/转化培养基优化组合 | 第61-62页 |
| 5.2.4 种子培养基初始pH对生物转化的影响 | 第62页 |
| 5.2.5 种龄对生物转化的影响 | 第62页 |
| 5.2.6 转种量对生物转化的影响 | 第62页 |
| 5.2.7 转化培养基初始pH对生物转化的影响 | 第62页 |
| 5.2.8 替代实验 | 第62页 |
| 5.2.9 溶氧量对生物转化的影响 | 第62页 |
| 5.2.10 投料时间对生物转化的影响 | 第62-63页 |
| 5.2.11 投料量对生物转化的影响 | 第63页 |
| 5.2.12 转化终点的测定 | 第63页 |
| 5.2.13 金属离子对生物转化的影响 | 第63页 |
| 5.3 实验结果 | 第63-72页 |
| 5.3.1 单因子实验考察培养基组成 | 第63-65页 |
| 5.3.2 培养基碳源/氮源(C/N)组成及配比的选择 | 第65页 |
| 5.3.3 种子培养基与转化培养基初步筛选 | 第65-66页 |
| 5.3.4 种子培养基初始pH对生物转化的影响 | 第66页 |
| 5.3.5 转种量对生物转化的影响 | 第66-67页 |
| 5.3.6 种龄对生物转化的影响 | 第67页 |
| 5.3.7 转化培养基初始pH对生物转化的影响 | 第67-68页 |
| 5.3.8 替代实验 | 第68-69页 |
| 5.3.9 溶氧量对生物转化的影响 | 第69页 |
| 5.3.10 投料时间对生物转化的影响 | 第69-70页 |
| 5.3.11 投料量对生物化的影响 | 第70页 |
| 5.3.12 转化终点的测定 | 第70-71页 |
| 5.3.13 金属离子对生物转化的影响 | 第71-72页 |
| 5.4 小结 | 第72页 |
| 5.5 讨论 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 发表文章目录 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
