| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-30页 |
| 1.1 研究背景 | 第13页 |
| 1.2 辅酶再生研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 辅酶再生的重要性 | 第13-14页 |
| 1.2.2 辅酶再生的方法 | 第14-15页 |
| 1.2.3 辅酶再生的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶研究进展 | 第16-22页 |
| 1.3.1 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶来源和同源性 | 第16-19页 |
| 1.3.2 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的酶学特性 | 第19页 |
| 1.3.3 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化机制 | 第19-20页 |
| 1.3.4 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶在辅酶循环中的应用 | 第20-21页 |
| 1.3.5 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶与细胞生长发育及临床疾病 | 第21-22页 |
| 1.4 甾体C_(11)α-羟基化研究进展 | 第22-28页 |
| 1.4.1 甾体化合物概述 | 第22-24页 |
| 1.4.2 化学法引入甾体化合物C_(11)羟基 | 第24-27页 |
| 1.4.3 生物转化甾体化合物C_(11)羟基化 | 第27-28页 |
| 1.5 本论文的研究思路及内容 | 第28-30页 |
| 第二章 米根霉G6PDH基因克隆及表达载体构建 | 第30-38页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第30-33页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.2.2 培养基和相关溶液配制配制 | 第31页 |
| 2.2.3 菌种活化和培养 | 第31页 |
| 2.2.4 米根霉总RNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.5 小量质粒DNA的制备方法 | 第32页 |
| 2.2.6 感受态细胞制备转化和阳性转化子鉴定和筛选方法 | 第32页 |
| 2.2.7 米根霉G6PDH基因的克隆 | 第32页 |
| 2.2.8 真菌表达载体PCB 1004-G6PDH的构建 | 第32-33页 |
| 2.3 实验结果及讨论 | 第33-37页 |
| 2.3.1 米根霉RNA提取 | 第33-34页 |
| 2.3.2 米根霉G6PDH基因的克隆 | 第34-36页 |
| 2.3.3 真菌表达载体PCB 1004-G6PDH构建 | 第36-37页 |
| 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 黑根霉原生质体制备和PEG介导的原生质体转化 | 第38-49页 |
| 3.1 引言 | 第38-39页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第39-44页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.2.2 培养基和菌种培养 | 第39页 |
| 3.2.3 本章使用的相关溶液配制 | 第39-40页 |
| 3.2.4 黑根霉对潮霉素敏感性试验 | 第40页 |
| 3.2.5 黑根霉原生质体制备 | 第40-41页 |
| 3.2.6 PEG介导的原生质体转化及其转化子抗性筛选 | 第41页 |
| 3.2.7 基因组DNA提取和PCR验证 | 第41-44页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第44-48页 |
| 3.3.1 黑根霉对潮霉素敏感性试验 | 第44页 |
| 3.3.2 黑根霉原生质体制备 | 第44-46页 |
| 3.3.3 原生质体转化和转化子抗性筛选 | 第46页 |
| 3.3.4 黑根霉和转化子基因组DNA提取及PCR验证 | 第46-48页 |
| 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 摇瓶发酵转化甾体C_(11)α-羟基化条件的研究 | 第49-61页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第49-51页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第51-59页 |
| 4.3.1 沃氏氧化物和霉菌氧化物HPLC分析 | 第51-52页 |
| 4.3.2 碳源对菌株生长和转化率的影响 | 第52-54页 |
| 4.3.3 有机氮源对菌株生长和转化率的影响 | 第54-57页 |
| 4.3.4 无机氮源对菌株生长和转化率的影响 | 第57-59页 |
| 本章小结 | 第59-61页 |
| 第五章 结论和展望 | 第61-64页 |
| 5.1 结论 | 第61-62页 |
| 5.2 展望与建议 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 附录 | 第73-76页 |
| 附录1 实验涉及的主要药品与试剂 | 第73-75页 |
| 附录2 实验涉及的主要仪器设备 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77页 |
