| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 英文缩略词表 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-28页 |
| 1.1 急性呼吸窘迫综合征概述 | 第18-19页 |
| 1.2 ARDS与免疫炎症反应 | 第19-20页 |
| 1.3 中性粒细胞与ARDS | 第20-22页 |
| 1.4 中性粒细胞与Treg细胞 | 第22页 |
| 1.5 中性粒细胞与Th17细胞 | 第22-23页 |
| 1.6 ARDS与Th17/Treg平衡 | 第23-25页 |
| 1.7 本研究的目的、内容和技术路线 | 第25-28页 |
| 1.7.1 研究目的 | 第25-26页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第26页 |
| 1.7.3 技术路线 | 第26-28页 |
| 第二章 ARDS患者外周血Th17/Treg细胞失衡及其临床意义 | 第28-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-35页 |
| 2.1.1 研究对象和方案 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要抗体和试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 2.1.4 数据收集和结局定义 | 第31-32页 |
| 2.1.5 外周血标本收集和检测 | 第32页 |
| 2.1.6 ELISA检测外周血细胞因子 | 第32-33页 |
| 2.1.7 人外周血单个核细胞(PBMC)分离 | 第33页 |
| 2.1.8 流式检测外周血Th17、Treg细胞 | 第33-35页 |
| 2.1.9 统计学分析 | 第35页 |
| 2.2 结果 | 第35-44页 |
| 2.2.1 ARDS患者临床特征以及结局 | 第35-36页 |
| 2.2.2 ARDS患者外周血炎症指标、Th17、Treg细胞及其相关细胞因子的变化 | 第36-40页 |
| 2.2.3 ARDS患者外周血Th17/Treg比值与疾病严重程度和临床结局的相关性 | 第40-43页 |
| 2.2.4 ARDS患者28d病死率的预测因素 | 第43-44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-48页 |
| 2.4 本研究的局限性 | 第48-49页 |
| 2.5 结论 | 第49-50页 |
| 第三章 ARDS患者中性粒细胞对Th17/Treg细胞平衡的影响 | 第50-85页 |
| 3.1 材料与方法 | 第51-68页 |
| 3.1.1 研究对象和方案 | 第51-52页 |
| 3.1.2 主要研究抗体和试剂 | 第52-53页 |
| 3.1.3 主要研究仪器 | 第53-54页 |
| 3.1.4 外周血标本收集和检测 | 第54页 |
| 3.1.5 ELISA检测外周血、培养细胞上清液中以及PMN细胞内的细胞因子 | 第54-55页 |
| 3.1.6 人外周血单个核细胞(PBMCs)分离 | 第55页 |
| 3.1.7 免疫磁珠(MACS)法分离CD4~+T细胞 | 第55-56页 |
| 3.1.8 免疫磁珠(MACS)法分离Th17细胞 | 第56-57页 |
| 3.1.9 免疫磁珠(MACS)法分离PMN细胞 | 第57-58页 |
| 3.1.10 体外细胞培养实验 | 第58-59页 |
| 3.1.11 流式细胞仪检测免疫磁珠法分离所得细胞的纯度 | 第59-60页 |
| 3.1.12 流式检测Th17细胞表面CCR2、CCR6受体的表达 | 第60页 |
| 3.1.13 流式检测PMN细胞表面MHCⅡ、共刺激分子CD80/CD86的表达 | 第60页 |
| 3.1.14 流式检测体外细胞培养体系中Th17、Treg细胞的表达 | 第60页 |
| 3.1.15 Western Blot检测PMN细胞表达MHCⅡ类分子 | 第60-65页 |
| 3.1.16 RT-PCR法检验Foxp3 mRNA、RoR-mRNA的表达 | 第65-67页 |
| 3.1.17 体外细胞趋化实验 | 第67-68页 |
| 3.1.18 统计学分析 | 第68页 |
| 3.2 结果 | 第68-80页 |
| 3.2.1 ARDS患者外周血PMN与Th17细胞和Treg细胞的相关性 | 第68-69页 |
| 3.2.2 免疫磁珠法获取外周血初始CD4~+T细胞、PMN及Th17细胞 | 第69-71页 |
| 3.2.3 外周血PMN对初始CD4~+T细胞极化方向的影响 | 第71-73页 |
| 3.2.4 PMN促进Th17细胞分化的机制 | 第73-77页 |
| 3.2.5 PMN对Th17细胞趋化的影响 | 第77-80页 |
| 3.3 讨论 | 第80-84页 |
| 3.4 结论 | 第84-85页 |
| 第四章 ARDS患者Th17、Treg细胞对中性粒细胞趋化、活性及凋亡的影响 | 第85-101页 |
| 4.1 材料与方法 | 第85-92页 |
| 4.1.1 研究对象和方案 | 第85-86页 |
| 4.1.2 主要研究抗体和试剂 | 第86-87页 |
| 4.1.3 主要研究仪器 | 第87页 |
| 4.1.4 外周血标本收集和检测 | 第87-88页 |
| 4.1.5 ELISA法检测Th17、Treg细胞内的细胞因子 | 第88页 |
| 4.1.6 人外周血单个核细胞(PBMCs)分离 | 第88页 |
| 4.1.7 免疫磁珠(MACS)法分离、纯化Th17细胞 | 第88页 |
| 4.1.8 免疫磁珠(MACS)法分离、纯化PMN细胞 | 第88页 |
| 4.1.9 免疫磁珠(MACS)法分离、纯化Treg细胞 | 第88-90页 |
| 4.1.10 体外细胞培养实验 | 第90页 |
| 4.1.11 流式细胞仪检测免疫磁珠法分离所得细胞的纯度 | 第90-91页 |
| 4.1.12 流式细胞仪检测PMN细胞表面CD11b的表达 | 第91页 |
| 4.1.13 流式细胞仪检测PMN细胞的凋亡 | 第91页 |
| 4.1.14 体外细胞趋化实验 | 第91-92页 |
| 4.1.15 统计学分析 | 第92页 |
| 4.2 结果 | 第92-99页 |
| 4.2.1 免疫磁珠法获取外周血PMN、Th17和Treg细胞 | 第92-93页 |
| 4.2.2 Th17、Treg细胞对PMN趋化的影响 | 第93-95页 |
| 4.2.3 Th17、Treg细胞对PMN活性的影响 | 第95-97页 |
| 4.2.4 Th17、Treg细胞对PMN凋亡的影响 | 第97-99页 |
| 4.3 讨论 | 第99-100页 |
| 4.4 结论 | 第100-101页 |
| 第五章 主要结论、学术创新与下一步研究设想 | 第101-103页 |
| 5.1 主要结论 | 第101-102页 |
| 5.2 创新性 | 第102页 |
| 5.3 下一步研究设想 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及其他科研成果 | 第115页 |
