| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 酶多功能性 | 第11-13页 |
| 1.1.1 酶多功能性概述 | 第11页 |
| 1.1.2 酶多功能性分类 | 第11-12页 |
| 1.1.3 酶催化多功能性 | 第12-13页 |
| 1.2 酶催化多功能改造的策略和研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 合理性设计改变酶催化多功能性 | 第13-14页 |
| 1.2.2 非理性设计改变酶催化多功能性 | 第14页 |
| 1.2.3 半理性设计改变酶催化多功能性 | 第14-16页 |
| 1.4 南极假丝酵母脂肪酶 B（CalB）简介 | 第16-21页 |
| 1.4.1 CalB 来源 | 第16页 |
| 1.4.2 CalB 的结构 | 第16-18页 |
| 1.4.3 CalB 的优势及其应用 | 第18页 |
| 1.4.4 CalB 催化多功能性研究进展 | 第18-21页 |
| 第2章 CalB 在大肠杆菌中高效表达 | 第21-28页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.2.1 实验材料及所用试剂 | 第21页 |
| 2.2.2 溶液及培养基配制 | 第21-23页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-25页 |
| 2.3.1 CalB 诱导表达、纯化及表达条件优化 | 第24页 |
| 2.3.2 CalB 的活力检测 | 第24-25页 |
| 2.4 实验结果及讨论 | 第25-26页 |
| 2.4.1 CalB 诱导表达及纯化 | 第25-26页 |
| 2.4.2 表达条件优化 | 第26页 |
| 2.5 小结 | 第26-28页 |
| 第3章 酶活性中心关键突变改变酶的催化多功能性 | 第28-48页 |
| 3.1 前言 | 第28页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第28-29页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第28-29页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第29页 |
| 3.2.3 主要软件 | 第29页 |
| 3.3 实验方法 | 第29-34页 |
| 3.3.1 氨基酸靶标位点的确定 | 第29-30页 |
| 3.3.2 迭代饱和突变库的构建和筛选 | 第30-33页 |
| 3.3.3 基本酶学性质的表征 | 第33-34页 |
| 3.4 结果与分析 | 第34-47页 |
| 3.4.1 迭代饱和突变库的构建和筛选 | 第34-44页 |
| 3.4.2 基本酶学性质表征 | 第44-47页 |
| 3.5 小结 | 第47-48页 |
| 第4章 CalB 催化多功能性的机理研究 | 第48-55页 |
| 4.1 前言 | 第48页 |
| 4.2 软件及仪器 | 第48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-49页 |
| 4.3.1 同源建模 | 第48-49页 |
| 4.3.2 分子对接 | 第49页 |
| 4.4 结果与分析 | 第49-54页 |
| 4.4.1 同源建模 | 第49-52页 |
| 4.4.2 分子对接 | 第52-54页 |
| 4.5 小结 | 第54-55页 |
| 总结与展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 攻读硕士期间发表的文章 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |