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NPPC基因真核表达质粒的构建及其表达检测

摘要第6-7页
Abstract第7页
缩略语索引第12-13页
第一章 绪论第13-33页
    1.1 糖尿病下肢动脉硬化闭塞症第13-21页
        1.1.1 糖尿病下肢动脉硬化闭塞症简介第13-14页
        1.1.2 糖尿病下肢动脉硬化闭塞症的主要病理改变第14页
        1.1.3 糖尿病下肢动脉硬化闭塞症的病理分期、诊断及治疗现状第14-16页
        1.1.4 治疗药物第16-19页
        1.1.5 下肢动脉硬化闭塞症发病机制第19-21页
        1.1.6 糖尿病下肢动脉硬化闭塞症发病的分子机制第21页
    1.2 C型利钠肽第21-23页
        1.2.1 C型利钠肽及其受体第21-22页
        1.2.2 C型利钠肽的生理作用及其代谢第22-23页
    1.3 c型利钠肽影响糖尿病下肢闭塞症的作用机制第23-31页
        1.3.1 Akt/PKB下游通路与糖尿病下肢动脉闭塞症第23-27页
        1.3.2 Erk1/2下游通路与糖尿病下肢动脉闭塞症第27-29页
        1.3.3 C型利钠肽与内皮素-1在糖尿病下肢动脉硬化中的相互关系第29页
        1.3.4 C型利钠肽的产生与肿瘤坏死因子、白介素的作用关系第29-31页
    1.4 糖尿病动物模型的建立第31-32页
    1.5 本论文研究意义第32-33页
第二章 RT-PCR方法克隆小鼠C型利钠肽基因第33-43页
    2.1 引言第33-34页
    2.2 实验方案第34页
    2.3 实验材料和方法第34-40页
        2.3.1 实验小鼠第34页
        2.3.2 引物设计第34-35页
        2.3.3 实验试剂第35页
        2.3.4 实验器材第35-36页
        2.3.5 试剂配方第36页
        2.3.6 反应体系第36-37页
        2.3.7 实验方法第37-40页
    2.4 实验结果讨论第40-41页
        2.4.1 总RNA电泳检测第40页
        2.4.2 RNA纯度测定第40页
        2.4.3 RT-PCR电泳结果检测第40-41页
    2.5 实验小结第41-43页
第三章 构建pEGFP-C1-nppc质粒第43-53页
    3.1 引言第43页
    3.2 实验方案第43-44页
    3.3 实验材料和方法第44-50页
        3.3.1 实验载体和菌株第44-45页
        3.3.2 实验试剂第45页
        3.3.3 实验器材第45页
        3.3.4 反应体系第45-46页
        3.3.5 培养基配方第46-47页
        3.3.6 实验方法第47-50页
    3.4 实验结果讨论第50-52页
        3.4.1 重组质粒双酶切电泳检测第50页
        3.4.2 测序结果第50-52页
    3.5 实验小结第52-53页
第四章 细胞转染及实时定量PCR第53-61页
    4.1 引言第53页
    4.2 实验方案第53-54页
    4.3 实验材料和方法第54-56页
        4.3.1 引物设计第54页
        4.3.2 实验试剂第54页
        4.3.3 实验器材第54-55页
        4.3.4 反应体系第55-56页
    4.4 实验方法第56-58页
    4.5 实验结果讨论第58-59页
    4.6 实验小结第59-61页
第五章 细胞转染及western blot第61-70页
    5.1 引言第61页
    5.2 实验方案第61-62页
    5.3 实验材料和方法第62-65页
        5.3.1 实验试剂第62页
        5.3.2 试剂配方第62-65页
    5.4 实验方法第65-67页
    5.5 实验结果讨论第67-68页
        5.5.1 蛋白含量测定第67-68页
        5.5.2 western blot结果第68页
    5.6 实验小结第68-70页
第六章 总结与展望第70-72页
致谢第72-73页
参考文献第73-81页
附录A第81页

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