| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 符号及缩略语说明 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| 1 植物抵御非生物胁迫的内源性保护物质 | 第15-18页 |
| ·甜菜碱 | 第16页 |
| ·脯氨酸 | 第16-17页 |
| ·糖类物质 | 第17页 |
| ·晚期胚胎发生丰富蛋白 | 第17-18页 |
| 2 非生物胁迫的信号转导 | 第18-21页 |
| ·非生物胁迫信号感受器和第二信号分子 | 第18-19页 |
| ·蛋白磷酸化级联反应 | 第19-20页 |
| ·ABA与胁迫信号转导 | 第20页 |
| ·胁迫响应基因的激活 | 第20-21页 |
| 3 参与植物环境胁迫响应的转录因子 | 第21-25页 |
| ·转录因子 | 第21-22页 |
| ·转录因子的调控作用 | 第22-23页 |
| ·CBF类转录因子的研究 | 第23-25页 |
| ·AP2/EREBP类转录因子 | 第23页 |
| ·CBF类转录因子 | 第23-25页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第25-27页 |
| 第二章 富士苹果转录因子基因MdCBF1的克隆以及表达分析 | 第27-43页 |
| 1 材料 | 第27页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·化学试剂和酶制剂 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-31页 |
| ·CTAB法提取富士苹果总RNA | 第27-28页 |
| ·总RNA中基因组DNA的去除 | 第28-29页 |
| ·反转录合成cDNA | 第29页 |
| ·克隆富士苹果MdCBF1基因 | 第29-30页 |
| ·DNA序列和数据分析 | 第30页 |
| ·植物材料处理 | 第30页 |
| ·苹果总RNA提取、DNA去除和反转录 | 第30页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第30-31页 |
| ·模板cDNA的相对定量 | 第30页 |
| ·MdCBF1的PCR扩增 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·富士苹果总RNA提取 | 第31页 |
| ·MdCBF1基因序列分析和比对 | 第31-35页 |
| ·MdCBF1氨基酸组成成分及理化性质分析 | 第35-36页 |
| ·MdCBF1二级结构预测 | 第36-37页 |
| ·MdCBF1三级结构预测 | 第37-38页 |
| ·MdCBF1表达模式分析 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 MdCBF1在转基因拟南芥中的功能分析 | 第43-59页 |
| 1 材料与方法 | 第43-49页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·细菌菌株和质粒 | 第43页 |
| ·化学试剂和酶制剂 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·含双CAMV 35S启动子的双元载体YG8406构建 | 第43-44页 |
| ·电击法转化农杆菌 | 第44页 |
| ·拟南芥转化 | 第44-45页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·细菌菌株 | 第44页 |
| ·化学试剂和酶制剂 | 第44页 |
| ·拟南芥的培养 | 第44-45页 |
| ·农杆菌的准备 | 第45页 |
| ·拟南芥蘸花法转化 | 第45页 |
| ·拟南芥转化植株种子的筛选 | 第45页 |
| ·转基因阳性植株的检测 | 第45-47页 |
| ·GUS组织化学染色分析 | 第45-46页 |
| ·转基因阳性植株的PCR检测 | 第46页 |
| ·转基因阳性植株的RT-PCR检测 | 第46-47页 |
| ·拟南芥转基因植株的低温和干旱测试 | 第47-49页 |
| ·抗冻测试 | 第47页 |
| ·脯氨酸测、丙二醛以及电导率测定 | 第47-48页 |
| ·抗旱测试 | 第48-49页 |
| ·抗逆相关基因的半定量RT-PCR检测 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-56页 |
| ·农杆菌转化双元载体的构建 | 第49-50页 |
| ·MdCBF1基因的拟南芥转化及转基因纯系植株的鉴定 | 第50-51页 |
| ·拟南芥转基因植株的低温处理 | 第51-55页 |
| ·转MdCBF1基因的拟南芥植株脯氨酸含量的测定 | 第52-53页 |
| ·转MdCBF1基因的拟南芥植株丙二醛含量的测定 | 第53-54页 |
| ·转MdCBF1基因的拟南芥植株电导率含量的测定 | 第54-55页 |
| ·拟南芥转基因植株的干旱处理 | 第55-56页 |
| ·半定量RT-PCR检测 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-59页 |
| 全文总结与讨论 | 第59-61页 |
| 1 总结 | 第59-60页 |
| 2 讨论 | 第60-61页 |
| 创新点 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71-87页 |
| 1 材料与方法 | 第73-74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-82页 |
| ·葡萄ERF基因cDNA序列的电子克隆 | 第74-75页 |
| ·葡萄ERF基因序列相似性比对以及进化关系分析 | 第75-78页 |
| ·葡萄ERF基因及其推导氨基酸序列组成成分与理化性质分析 | 第78-80页 |
| ·葡萄ERF氨基酸序列的亲水性/疏水性分析 | 第80页 |
| ·二级结构功能预测 | 第80-82页 |
| 3 讨论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-87页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
