| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 前言 | 第8-22页 |
| 1.1 课题研究背景及意义 | 第8页 |
| 1.2 糖链与肿瘤的关系 | 第8-11页 |
| 1.2.1 糖链的概述 | 第8-9页 |
| 1.2.2 N-糖链与肿瘤的关系 | 第9-11页 |
| 1.3 癌细胞表面糖链结构的研究 | 第11-14页 |
| 1.3.1 糖链的分离技术与应用 | 第11-12页 |
| 1.3.2 糖链的结构解析方法 | 第12-14页 |
| 1.4 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶的相关研究进展 | 第14-20页 |
| 1.4.1 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶的概述 | 第14-17页 |
| 1.4.2 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶（GnT）的功能与研究方法 | 第17-18页 |
| 1.4.3 GnT-IV 的研究现状 | 第18-20页 |
| 1.5 课题主要研究内容 | 第20-22页 |
| 1.5.1 肝癌细胞中特异性 N-糖链的分离与结构的初步解析 | 第20-21页 |
| 1.5.2 肝癌细胞中 GnT-IVa 经 RNAi 后相关功能的初步研究 | 第21页 |
| 1.5.3 实验技术路线图 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第22页 |
| 2.1.2 实验仪器及耗材 | 第22-23页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.2 特异性 N-糖链的分离及结构解析 | 第24-27页 |
| 2.2.1 糖苷酶酶切细胞膜蛋白 | 第24-26页 |
| 2.2.2 高效液相色谱分离膜蛋白中 N-糖链 | 第26-27页 |
| 2.2.3 糖苷酶酶切解析糖链结构 | 第27页 |
| 2.3 GnT-IVa 经 RNAi 后的表达研究 | 第27-33页 |
| 2.3.1 GnT-IVa RNAi 序列的设计 | 第27-28页 |
| 2.3.2 高表达 GnT-IVa 肝癌细胞株的筛选 | 第28页 |
| 2.3.3 细胞培养与转染 | 第28页 |
| 2.3.4 RT-PCR 检测 GnT-IVa 表达 | 第28-30页 |
| 2.3.5 Western blot 检测 GnT-IVa 表达 | 第30-31页 |
| 2.3.6 MTT 检测细胞活性 | 第31页 |
| 2.3.7 细胞划痕实验 | 第31页 |
| 2.3.8 细胞迁移侵袭实验 | 第31-33页 |
| 第三章 肝癌细胞系中特异性 N-糖链的分离及结构的初步分析 | 第33-41页 |
| 3.1 肝癌细胞表面特异性 N-糖链的分离 | 第33-35页 |
| 3.2 肝癌细胞系中特异性 N-糖链结构的初步解析 | 第35-39页 |
| 3.3 讨论 | 第39-40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第四章 GnT-IVa 经 RNAi 表达变化功能的初步研究 | 第41-56页 |
| 4.1 利用荧光标记的 siRNA（FAM-siRNA）检测转染效率 | 第41-42页 |
| 4.2 GnT-IVa 经 RNAi 后干扰效果检测 | 第42-44页 |
| 4.2.1 qRT-PCR 检测干扰后细胞中 GnT-IVa 在 RNA 水平上的表达变化 | 第42-43页 |
| 4.2.2 Western blot 检测干扰后细胞中 GnT-IVa 在蛋白质水平上的表达变化 | 第43-44页 |
| 4.3 GnT-IVa 经 RNAi 后的肝癌细胞表面特异性糖链的表达变化 | 第44-45页 |
| 4.4 GnT-IVa 经 RNAi 后对肝癌细胞生物学行为的影响 | 第45-53页 |
| 4.4.1 MTT 检测 RNAi 后对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第45-47页 |
| 4.4.2 细胞划痕检测 RNAi 后对肝癌细胞运动能力的影响 | 第47-49页 |
| 4.4.3 细胞侵袭迁移实验检测 RNAi 后对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响 | 第49-53页 |
| 4.5 讨论 | 第53-54页 |
| 4.6 本章小结 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
