| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 前言 | 第10-14页 |
| ·植物病原真菌的信号转导途径 | 第10-11页 |
| ·PKC 基因研究进展 | 第11-12页 |
| ·本文的研究内容及目的 | 第12-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第14页 |
| ·供试培养基 | 第14页 |
| ·供试药品及主要试剂 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·玉米大斑病菌PKC 基因表达规律分析 | 第15-17页 |
| ·菌株的处理 | 第15页 |
| ·总RNA 的提取 | 第15-16页 |
| ·RNA 质量的检测 | 第16页 |
| ·总 RNA 的纯化 | 第16页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第16-17页 |
| ·RT-PCR 引物设计 | 第17页 |
| ·RT-PCR 扩增及数据分析 | 第17页 |
| ·半定量RT-PCR 的反应条件 | 第17页 |
| ·PKC 基因反义表达载体转化玉米大斑病菌原生质体 | 第17-23页 |
| ·突变体的PCR 验证 | 第18-19页 |
| ·突变体半定量RT-PCR 验证及分析 | 第19-20页 |
| ·突变体Northern blot 验证 | 第20-23页 |
| ·玉米大斑病菌PKC 基因反义表达突变体分析 | 第23-25页 |
| ·菌落形态的观察和菌落生长速度测定 | 第23页 |
| ·孢子萌发的观察 | 第23页 |
| ·附着胞的观察 | 第23页 |
| ·附着胞侵染能力的显微观察 | 第23页 |
| ·突变菌株致病力测定 | 第23-24页 |
| ·HT-毒素活性分析 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-36页 |
| ·PKC 基因的表达规律分析 | 第25-28页 |
| ·不同碳源物质对PKC 基因表达的影响 | 第25页 |
| ·不同氮源物质对PKC 基因表达的影响 | 第25-26页 |
| ·不同金属离子对PKC 基因表达的影响 | 第26页 |
| ·高渗胁迫对PKC 基因表达的影响 | 第26-28页 |
| ·PKC 基因反义表达突变体的获得 | 第28-30页 |
| ·原生质体转化和突变体筛选 | 第28-29页 |
| ·反义表达突变体的获得与PCR 验证 | 第29页 |
| ·半定量RT-PCR | 第29页 |
| ·Northern blot 验证 | 第29-30页 |
| ·PKC 基因反义表达突变体性状分析 | 第30-36页 |
| ·菌落形态观察及生长速率测定 | 第30-31页 |
| ·PKC 基因对分生孢子发育的影响 | 第31-32页 |
| ·PKC 基因对附着胞的影响 | 第32-33页 |
| ·孢子穿透能力观察 | 第33页 |
| ·突变体菌株致病性观察 | 第33-34页 |
| ·反义表达突变体的 HT-毒素活性分析 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| ·关于 PKC 基因表达规律的分析 | 第36页 |
| ·反义抑制技术 | 第36-37页 |
| ·PKC 基因的功能研究 | 第37-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第45-46页 |
| 作者简历 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |