| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 中英文名称对照与缩略词表 | 第13-15页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 实验研究 | 第17-52页 |
| 第一部分 细胞水平，KU0063794、Rapamycin间接检测Rictor在血管生成过程中的作用机制研究 | 第17-40页 |
| 1.实验材料 | 第17-19页 |
| 1.1 实验动物 | 第17页 |
| 1.2 实验药物 | 第17页 |
| 1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
| 1.4 主要仪器 | 第18页 |
| 1.5 药物及试剂配制 | 第18-19页 |
| 2.实验方法 | 第19-27页 |
| 2.1 MAECs原代培养 | 第19-20页 |
| 2.2 细胞复苏与冻存 | 第20页 |
| 2.3 细胞计数 | 第20页 |
| 2.4 免疫荧光法鉴定MAECs | 第20-21页 |
| 2.5 CCK8法测定药物对MAECs生存影响 | 第21-22页 |
| 2.6 iCELLigence实时细胞分析系统检测药物对MAECs增殖的影响 | 第22页 |
| 2.7 mTOR-Rictor对细胞侵袭、迁移能力的影响 | 第22-23页 |
| 2.7.1 侵袭实验 | 第22-23页 |
| 2.7.2 划痕实验 | 第23页 |
| 2.8 MAECs成环实验 | 第23-24页 |
| 2.9 缺氧情况下酶联免疫法（ELISA）检测VEGF、ANG1的释放量 | 第24页 |
| 2.10 Rictor对血管新生及成熟过程中相关蛋白表达变化的影响 | 第24-27页 |
| 2.10.1 用于蛋白印迹溶液的配制 | 第24-25页 |
| 2.10.2 MAECs和内皮组织总蛋白的提取和定量 | 第25页 |
| 2.10.3 凝胶配置、电泳 | 第25-26页 |
| 2.10.4 转膜 | 第26页 |
| 2.10.5 抗体结合 | 第26-27页 |
| 2.10.6 ECL化学发光检测 | 第27页 |
| 3.统计学分析 | 第27页 |
| 4.结果 | 第27-37页 |
| 4.1 MAECs的形态观察 | 第27-28页 |
| 4.2 免疫荧光鉴定MAECs | 第28-29页 |
| 4.3 KU0063794及Rapamycin对MAECs存活的影响 | 第29-30页 |
| 4.4 Rictor对MAECs迁移、侵袭能力的影响 | 第30-31页 |
| 4.5 Rictor对MAECs成环能力的影响 | 第31-33页 |
| 4.6 酶联反应法测量VEGF、ANG1结果 | 第33-34页 |
| 4.7 Rictor的表达变化对血管形成成熟的相关蛋白影响 | 第34-37页 |
| 5.讨论 | 第37-39页 |
| 6.结论 | 第39-40页 |
| 第二部分 细胞水平及动物水平，RNA干扰验证Rictor对血管生成的调节作用 | 第40-52页 |
| 1.实验材料 | 第40-41页 |
| 1.1 实验动物 | 第40页 |
| 1.2 实验试剂及仪器 | 第40-41页 |
| 2.实验方法 | 第41-45页 |
| 2.1 细胞水平干扰Rictor表达 | 第41-44页 |
| 2.1.1 脂质体转染MAECs | 第41页 |
| 2.1.2 细胞蛋白提取 | 第41页 |
| 2.1.3 western blotting实验 | 第41页 |
| 2.1.4 总RNA提取（Trizol法） | 第41-42页 |
| 2.1.5 逆转录 | 第42-43页 |
| 2.1.6 QPCR检测 | 第43-44页 |
| 2.1.7 酶联免疫法测ANG1含量 | 第44页 |
| 2.2 动物水平验证Rictor在血管生成中作用 | 第44-45页 |
| 2.2.1 小鼠下肢缺血模型建造 | 第44页 |
| 2.2.2 体内Rictor干扰实验 | 第44-45页 |
| 2.2.2.1 组织蛋白提取 | 第44-45页 |
| 2.2.3 免疫荧光法检测Rictor下调术后7天，血管新生情况 | 第45页 |
| 3.统计学分析 | 第45页 |
| 4.实验结果 | 第45-50页 |
| 4.1 western blot检测Rictor下调后血管生成相关蛋白的表达变化 | 第45-47页 |
| 4.2 QPCR结果 | 第47-48页 |
| 4.3 Rictor下调后MAECs中ANG1含量测定结果 | 第48页 |
| 4.4 小鼠下肢缺血造模血管位置 | 第48-49页 |
| 4.5 体内干扰Rictor结果 | 第49页 |
| 4.6 免疫荧光法检测Rictor下调术后小鼠血管新生情况 | 第49-50页 |
| 5.讨论 | 第50-51页 |
| 6.结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 综述 | 第55-63页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
