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苔类植物黄酮类化合物生物合成关键酶功能鉴定

中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
符号说明第13-15页
第一章 文献综述第15-29页
    1 引言第15页
    2 黄酮类化合物的结构第15-16页
    3 黄酮类化合物的生理活性第16-17页
    4 黄酮类化合物生物合成途径第17-27页
        4.1 黄酮类化合物生物合成途径相关酶第18-27页
        4.2 类黄酮生物合成途径中转录因子调控作用第27页
    5 立题依据与研究内容第27-29页
第二章 钝鳞紫背苔和粗裂地钱查尔酮异构酶基因克隆和功能鉴定第29-55页
    1 前言第29页
    2 实验仪器设备及材料第29-31页
        2.1 植物材料第29页
        2.2 菌种与质粒第29页
        2.3 主要试剂和试剂盒第29-30页
        2.4 主要溶液及培养基第30-31页
        2.5 主要仪器第31页
        2.6 PCR引物序列第31页
    3 实验方法第31-43页
        3.1 序列的比对和分析第31-32页
        3.2 粗裂地钱RNA的提取第32页
        3.3 cDNA的合成第32-33页
        3.4 MpaCHIs基因克隆第33-37页
        3.5 钝鳞紫背苔目的基因的克隆第37-38页
        3.6 蛋白表达第38-41页
        3.7 蛋白酶活的测定第41-43页
    4 实验结果第43-54页
        4.1 PaCHIs及MpaCHIs的克隆和序列分析第43-44页
        4.2 PaCHIs和MpaCHIs进化树分析第44-45页
        4.3 序列比对第45-47页
        4.4 PaCHIs和MpaCHIs原核表达载体构建第47-48页
        4.5 PaCHI1s及MpaCHIs重组蛋白纯化及功能鉴定第48-52页
        4.6 酶学动力学参数测定第52-53页
        4.7 酶活产物手性分离第53-54页
    5 总结第54-55页
第三章 钝鳞紫背苔黄酮合酶Ⅰ(PaFNSⅠ)的基因克隆和功能鉴定第55-80页
    1 前言第55页
    2 实验仪器设备及材料第55-57页
        2.1 引物序列第55-57页
    3 实验方法第57-64页
        3.1 PaFNSⅠ序列比对和分析第57页
        3.2 目的片段的5’-RACE第57-58页
        3.3 PaFNSⅠ基因全长克隆第58-59页
        3.4 PaFNSⅠORF片段的克隆第59-60页
        3.5 PaFNSⅠ基因的内含子和外显子分析第60-61页
        3.6 定点突变第61-62页
        3.7 蛋白表达第62-63页
        3.8 蛋白酶活的测定第63-64页
    4 实验结果第64-78页
        4.1 PaFNSⅠ基因的克隆第64-65页
        4.2 PaFNSⅠ序列比对及进化树分析第65-67页
        4.3 原核表达载体构建第67-68页
        4.4 PaFNS Ⅰ重组蛋白纯化及功能鉴定第68-73页
        4.5 PaFNS Ⅰ定点突变及功能鉴定第73-78页
        4.6 酶学动力学参数测定第78页
    5 总结第78-80页
参考文献第80-89页
致谢第89-90页
攻读学位期间发表的学术论文目录第90-91页
学位论文评阅及答辩情况表第91页

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