中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
符号说明 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-29页 |
1 引言 | 第15页 |
2 黄酮类化合物的结构 | 第15-16页 |
3 黄酮类化合物的生理活性 | 第16-17页 |
4 黄酮类化合物生物合成途径 | 第17-27页 |
4.1 黄酮类化合物生物合成途径相关酶 | 第18-27页 |
4.2 类黄酮生物合成途径中转录因子调控作用 | 第27页 |
5 立题依据与研究内容 | 第27-29页 |
第二章 钝鳞紫背苔和粗裂地钱查尔酮异构酶基因克隆和功能鉴定 | 第29-55页 |
1 前言 | 第29页 |
2 实验仪器设备及材料 | 第29-31页 |
2.1 植物材料 | 第29页 |
2.2 菌种与质粒 | 第29页 |
2.3 主要试剂和试剂盒 | 第29-30页 |
2.4 主要溶液及培养基 | 第30-31页 |
2.5 主要仪器 | 第31页 |
2.6 PCR引物序列 | 第31页 |
3 实验方法 | 第31-43页 |
3.1 序列的比对和分析 | 第31-32页 |
3.2 粗裂地钱RNA的提取 | 第32页 |
3.3 cDNA的合成 | 第32-33页 |
3.4 MpaCHIs基因克隆 | 第33-37页 |
3.5 钝鳞紫背苔目的基因的克隆 | 第37-38页 |
3.6 蛋白表达 | 第38-41页 |
3.7 蛋白酶活的测定 | 第41-43页 |
4 实验结果 | 第43-54页 |
4.1 PaCHIs及MpaCHIs的克隆和序列分析 | 第43-44页 |
4.2 PaCHIs和MpaCHIs进化树分析 | 第44-45页 |
4.3 序列比对 | 第45-47页 |
4.4 PaCHIs和MpaCHIs原核表达载体构建 | 第47-48页 |
4.5 PaCHI1s及MpaCHIs重组蛋白纯化及功能鉴定 | 第48-52页 |
4.6 酶学动力学参数测定 | 第52-53页 |
4.7 酶活产物手性分离 | 第53-54页 |
5 总结 | 第54-55页 |
第三章 钝鳞紫背苔黄酮合酶Ⅰ(PaFNSⅠ)的基因克隆和功能鉴定 | 第55-80页 |
1 前言 | 第55页 |
2 实验仪器设备及材料 | 第55-57页 |
2.1 引物序列 | 第55-57页 |
3 实验方法 | 第57-64页 |
3.1 PaFNSⅠ序列比对和分析 | 第57页 |
3.2 目的片段的5’-RACE | 第57-58页 |
3.3 PaFNSⅠ基因全长克隆 | 第58-59页 |
3.4 PaFNSⅠORF片段的克隆 | 第59-60页 |
3.5 PaFNSⅠ基因的内含子和外显子分析 | 第60-61页 |
3.6 定点突变 | 第61-62页 |
3.7 蛋白表达 | 第62-63页 |
3.8 蛋白酶活的测定 | 第63-64页 |
4 实验结果 | 第64-78页 |
4.1 PaFNSⅠ基因的克隆 | 第64-65页 |
4.2 PaFNSⅠ序列比对及进化树分析 | 第65-67页 |
4.3 原核表达载体构建 | 第67-68页 |
4.4 PaFNS Ⅰ重组蛋白纯化及功能鉴定 | 第68-73页 |
4.5 PaFNS Ⅰ定点突变及功能鉴定 | 第73-78页 |
4.6 酶学动力学参数测定 | 第78页 |
5 总结 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第90-91页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第91页 |